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| MAGE-E1a荧光真核表达载体的构建 | |
| 引用本文： | 胡世颉,章翔,金岩,轩昆,金明,王西玲,张蓉.MAGE-E1a荧光真核表达载体的构建[J].第四军医大学学报,2003,24(22):2044-2047. |
| 作者姓名： | 胡世颉 章翔 金岩 轩昆 金明 王西玲 张蓉 |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学,西京医院全军神经外科研究所,陕西,西安,710033 2. 第四军医大学,秦都口腔医学院组织病理学教研室,陕西,西安,710033 3. 第四军医大学,秦都口腔医学院儿童口腔科,陕西,西安,710033 4. 第四军医大学,基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033 5. 第四军医大学,基础部药理学教研室,陕西,西安,710033 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (39970 752 ) |
| 摘 要： | 目的：构建MAGE-Ela与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体，为研究肿瘤疫苗中树突状细胞的作用奠定基础．方法：应用基因重组技术，将反转录PCR得到的MAGE-Ela基因克隆入荧光真核表达载体pEGFP-N3中，用含卡那霉素LB培养基平板筛选转化菌，阳性重组子经SalⅠ和KpnⅠ双酶切分析、PCR鉴定．结果：MAGE-Ela基因成功地亚克隆至真核表达载体pEGFP-N3中，获得MAGE-E1a／pEGEP-N3重组质粒．结论：MAGE-E1a基因克隆入pEGFP-N3质粒，成功构建MAGE-E1a／pEGFP-N3荧光真核表达载体，解决了MAGE-E1a基因转染的定位问题，为研究肿瘤疫苗奠定了基础。 |
| 关 键 词： | MAGE-Ela 绿色荧光蛋白 遗传载体 真核表达载体 基因克隆 基因转染 肿瘤疫苗 肿瘤治疗 |
| 文章编号： | 1000-2790(2003)22-2044-04 |
| 修稿时间： | 2003年8月10日 |
Construction of recombinant pEGFP- N3/MAGE-E1a plasmid |
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| Abstract: | AIM: To construct recombinant express vector fused with MAGE E1a gene and green fluorescent protein for the application of dendritic cells in tumor vaccine. METHODS: MAGE E1a gene was obtained by RT PCR and was cloned into fluorescent eukaryotic expressed vector pEGFP N3. The positive recombinants on LB plates were screened and identified by SalI and KpnI restriction analysis and PCR amplification. RESULTS: MAGE E1a gene was successfully inserted in the reverse direction into pEGFP N3 plasmid CONCLUSION: The fluorescent eukaryotic expressed vector MAGE E1a/ pEGFP N3 has been successfully constructed. |
| Keywords: | MAGE E1a gene green fluorescent protein genetic vectors cloning molecular |
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