兔抗mLAIR-1胞外区抗体的制备、纯化和鉴定 |
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引用本文: | 张圆,庄然,金伯泉,欧阳为明.兔抗mLAIR-1胞外区抗体的制备、纯化和鉴定[J].第四军医大学学报,2005,26(23):2201-2201. |
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作者姓名: | 张圆 庄然 金伯泉 欧阳为明 |
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摘 要: | 目的:表达并纯化小鼠白细胞相关免疫球蛋白样受体-1(mLAIR-1)胞膜外区与人IgG Fc段的融合蛋白,制备兔抗mLAIR-1胞膜外区的抗体.方法:构建真核表达载体,表达并纯化mLAIR-1-Fc融合蛋白.以mLAIR-1-Fc融合蛋白免疫家兔,用偶联mLAIR-1-Fc融合蛋白的Sepharose-4B亲和层析柱纯化多克隆抗体.用间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定多克隆抗体的特异性.结果:表达并纯化了mLAIR-1-hIgFc融合蛋白.以其免疫家兔,用亲和层析的方法纯化得到兔抗mLAIR-1胞膜外区的抗体,能与转染细胞和细胞表面天然mLAIR-1分子结合.结论:成功地构建了mLAIR-1胞膜外区基因的真核表达载体,表达并纯化了mLAIR-1-Fc融合蛋白.用偶联mLAIR-1-Fe融合蛋白的Sepharose-4B亲和层析柱纯化的兔抗mLAIR-1胞外区抗体,具有高特异性和高效价,为进一步研究mLAIR-1分子的结构和功能提供了新的手段.
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关 键 词: | 多克隆抗体 胞外区 纯化 家兔 免疫球蛋白样受体 间接免疫荧光染色 真核表达载体 亲和层析柱 |
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