心肌营养素-1对谷氨酸诱导神经元凋亡的抑制作用及机制

目的:探索重组腺病毒心肌营养素-1(Adv-CT-1)对谷氨酸(Glu)诱导神经元凋亡的保护作用及相关机制,为脑损伤提供新的治疗措施.方法:海马神经元分为3组:单纯Glu组、CT-1干预组(Adv-CT-1 转染)及对照组;利用相差显微镜检查、DNA片段检测、乳酸脱氢酶(LDH)活性及流式细胞技术,对各组神经元进行凋亡检测;Western Blot检测Caspase-3活性变化及线粒体内和胞浆内细胞色素C(Cyt C)水平变化.结果:Glu组神经元呈现明显形态改变,并见DNA梯状条带形成,CT-1组未见类似改变;Glu组神经元在Glu暴露后6,9及18 h,LDH释放量(14.3%,24.6%及28.4%)及凋亡率(6.2%,18.8%及26.4%)均高于CT-1组(分别为9.2%.16.1%,19.7%及3.6%,11.3%,16.1%);Glu组Caspase-3活性3 h即增加(25.6%),6及9 h达到62.4%及46.1%,CT-1组3 h时的Caspase-3表达分别为13.6%,45.2%及17.1%,均低于Glu组(P<0.05);Glu暴露30 min,神经元胞质内Cyt C水平增加,之后进行性增高,线粒体内Cyt C进行性减少;Glu暴露后6 h,CT-1组神经元胞质内Cytc较Glu组减少了55.7%(P<0.05).结论:Glu诱导海马神经元凋亡的机制涉及线粒体Cyt C释放,激活Caspase级联反应;CT-1对损伤神经元的保护作用可能是经由线粒体信号转导途径、通过减少线粒体Cyt C释放而实现的.

Protective effects of cardiotrophin-1 on apoptosis of hippocampal neurons induced by glutamate and its related mechanisms