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重组人肿瘤坏死因子α对人脂肪基质细胞体外成骨向分化的影响
引用本文:余日月,曾百进,刘云松,周永胜.重组人肿瘤坏死因子α对人脂肪基质细胞体外成骨向分化的影响[J].北京大学学报(医学版),2012,44(3):475-480.
作者姓名:余日月  曾百进  刘云松  周永胜
作者单位:首都医科大学附属北京世纪坛医院口腔科,北京,100038;首都医科大学附属北京口腔医院修复科;北京大学口腔医学院·口腔医院修复科,北京 100081
基金项目:国家自然科学基金,北京世纪坛医院科研基金
摘    要:目的:探讨一定浓度的重组人肿瘤坏死因子α(recombinant human tumor necrosis factor alpha,rhTNF-α)对人脂肪基质细胞(human adipose-derived stromal cells,hASCs)体外成骨向分化的影响。方法:采用第4代hASCs,根据培养基的不同分为4组:(1)基础培养DMEM+10%FBS(体积分数)+100 U/mL青霉素+100 mg/L链霉素];(2)基础培养+10μg/L rhTNF-α;(3)成骨向诱导培养(基础培养+100 nmol/L地塞米松+50μmol/L维生素C+10 mmol/Lβ-甘油磷酸);(4)成骨向诱导培养+10μg/L rhTNF-α。各组每3天更换相应培养基。在第3、7、14天和第21天进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)定量检测;在第14和21天进行钙结节染色和矿化沉积定量检测;并用反转录PCR检测成骨向诱导组核心结合因子α1(core-binding factorα1,Cbfa1)、Osterix(Osx)和骨钙素(osteocalcin,OC)等成骨相关基因的表达;在成骨向诱导的第3天,用实时定量PCR检测rhTNF-α对hASCs成骨相关基因表达的影响。结果:对碱性磷酸酶定量检测,在成骨向诱导的第14天(3.527±0.415 vs.2.345±0.354,P0.01)和第21天(3.106±0.105 vs.2.442±0.163,P0.01),10μg/L的rhTNF-α可以促进其表达;同样对于矿化沉积检测,在成骨向诱导的第14天(2.896±0.173 vs.0.679±0.173,P0.01)和第21天(2.231±0.233vs.1.729±0.229,P0.01),10μg/L的rhTNF-α也促进其表达;反转录PCR和实时定量PCR也表明rhTNF-α可以促进Cbfa1,Osx和OC的表达。结论:10μg/L的rhTNF-α可以促进成骨向诱导的hASCs体外成骨向分化,并可以促进成骨相关基因Cbfa1、Osx和OC的表达。

关 键 词:脂肪组织  间质细胞  骨生成  肿瘤坏死因子α

Recombinant human tumor necrosis factor-alpha promotes human adipose-derived stromal cells transforming into osteoblast in vitro
Yu Ri-yue,Zeng Bai-jin,Liu Yun-song,Zhou Yong-sheng.Recombinant human tumor necrosis factor-alpha promotes human adipose-derived stromal cells transforming into osteoblast in vitro[J].Journal of Peking University:Health Sciences,2012,44(3):475-480.
Authors:Yu Ri-yue  Zeng Bai-jin  Liu Yun-song  Zhou Yong-sheng
Institution:Department of Stomatology, Beijing Shijitan Hospital, Capital Medical University, Beijing, China.
Abstract:
Keywords:Adipose tissue  Stromal cells  Osteogenesis  Tumor necrosis factor-alpha
本文献已被 CNKI 万方数据 PubMed 等数据库收录!
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