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HIV 逆转录酶抑制剂酶联免疫评估方法的研究
引用本文:郭莹,王孝伟,徐扬,吕筱,王瑞平,刘俊义.HIV 逆转录酶抑制剂酶联免疫评估方法的研究[J].北京大学学报(医学版),2007,39(5):484-488.
作者姓名:郭莹  王孝伟  徐扬  吕筱  王瑞平  刘俊义
作者单位:1. 北京大学药学院化学生物学系,北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京,100083
2. 首都医科大学药学院
基金项目:国家自然科学基金 , 面向21世纪教育振兴行动计划(985计划)
摘    要:目的:建立检测逆转录酶活性的酶联免疫吸附实验方法,用于筛选人类免疫缺陷病毒(HIV-1)逆转录酶抑制剂.方法:利用DNA的固相固定技术将引物固定于96孔微量滴定板上,以poly(rA)· Oligo(dT)15为模板,在逆转录酶的作用下,将生物素标记的dUTP掺入,用碱性磷酯酶反应系统检测酶活性.结果: 建立了检测逆转录酶活性的酶联免疫(ELISA)法,并用ELISA法验证了已知阳性药物对逆转录酶的抑制作用,对ELISA法在动力学研究的应用做了初步探讨,评估ELISA法的重复性、稳定性、特异性和敏感性.结论: ELISA 法检测HIV-1 逆转录酶活性具有简单、快速、特异性强、重复性好、污染小等特点,适用于以HIV-1 逆转录酶为靶点的抑制剂的筛选及相关机制的研究.

关 键 词:HIV-1逆转录酶  酶联免疫吸附测定  动力学  逆转录酶抑制剂  酶联免疫  评估方法  动力学研究  ELISA  inhibitor  reverse  human  immunodeficiency  virus  evaluation  相关机制  靶点  污染  快速  敏感性  稳定性  应用  抑制作用  药物  阳性  验证
修稿时间:2007-02-27
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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