HIV 逆转录酶抑制剂酶联免疫评估方法的研究 |
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引用本文: | 郭莹,王孝伟,徐扬,吕筱,王瑞平,刘俊义.HIV 逆转录酶抑制剂酶联免疫评估方法的研究[J].北京大学学报(医学版),2007,39(5):484-488. |
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作者姓名: | 郭莹 王孝伟 徐扬 吕筱 王瑞平 刘俊义 |
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作者单位: | 1. 北京大学药学院化学生物学系,北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京,100083 2. 首都医科大学药学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金
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面向21世纪教育振兴行动计划(985计划) |
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摘 要: | 目的:建立检测逆转录酶活性的酶联免疫吸附实验方法,用于筛选人类免疫缺陷病毒(HIV-1)逆转录酶抑制剂.方法:利用DNA的固相固定技术将引物固定于96孔微量滴定板上,以poly(rA)· Oligo(dT)15为模板,在逆转录酶的作用下,将生物素标记的dUTP掺入,用碱性磷酯酶反应系统检测酶活性.结果: 建立了检测逆转录酶活性的酶联免疫(ELISA)法,并用ELISA法验证了已知阳性药物对逆转录酶的抑制作用,对ELISA法在动力学研究的应用做了初步探讨,评估ELISA法的重复性、稳定性、特异性和敏感性.结论: ELISA 法检测HIV-1 逆转录酶活性具有简单、快速、特异性强、重复性好、污染小等特点,适用于以HIV-1 逆转录酶为靶点的抑制剂的筛选及相关机制的研究.
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关 键 词: | HIV-1逆转录酶 酶联免疫吸附测定 动力学 逆转录酶抑制剂 酶联免疫 评估方法 动力学研究 ELISA inhibitor reverse human immunodeficiency virus evaluation 相关机制 靶点 污染 快速 敏感性 稳定性 应用 抑制作用 药物 阳性 验证 |
修稿时间: | 2007-02-27 |
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