| 抗血管性血友病因子单克隆抗体的制备及其初步鉴定 |
| |
| 引用本文： | 邵晓雁,沈飞,邵波静,李佩霞,阮长耿.抗血管性血友病因子单克隆抗体的制备及其初步鉴定[J].苏州大学学报(自然科学版),2003,23(2):137-141. |
| |
| 作者姓名： | 邵晓雁 沈飞 邵波静 李佩霞 阮长耿 |
| |
| 作者单位： | 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所血栓与止血研究室，苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所血栓与止血研究室，苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所血栓与止血研究室，苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所血栓与止血研究室，苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所血栓与止血研究室 苏州215006，苏州215006，苏州215006，苏州215006，苏州215006，导师 |
| |
| 摘 要： | 目的 研制抗人血管性血友病因子 (vWF)单克隆抗体 (McAb) ,鉴定其各种生物学特性。方法 Ⅷ因子浓缩物经Sepharose 4B凝胶柱提纯出vWF蛋白 ,免疫Balb/c小鼠 ,按常规方法融合并经间接ELISA方法筛选 ,制备稳定分泌抗vWFMcAb的细胞株 ,并对McAb的亚型、免疫活性及组织特异性等进行鉴定 ,运用放射免疫方法等与单抗SZ - 2 9,SZ - 34进行比较。结果 分离纯化出vWF ,vWF抗原含量为 12 0IU/mg ,并成功制备了一株抗人血管性血友病因子McAb ,暂命名为 4E10。琼脂糖双扩散鉴定为IgG1类 ,ELISA法测定其腹水效价为 5× 10 -5。放射免疫分析证实McAb4E10能特异的与血浆中vWF蛋白结合 ,应用间接免疫荧光法显示出与人脐静脉内皮细胞内vWF所特有的颗粒型荧光反应。流式细胞仪及免疫组化法测定表明McAb4E10与人脐静脉内皮细胞反应呈阳性 ,与外周血红细胞、白细胞、未活化的血小板不反应 ,而与其他组织细胞没有反应。放射免疫测定证实McAb4E10与SZ - 2 9,SZ - 34识别vWF蛋白上不同的结构。还原条件下Westernblot法证实McAb4E10和SZ -2 9都能识别相对分子量为 2 2 5kD和 180kD左右的单链蛋白多肽。结论 制备出了抗人血管性血友病因子单克隆抗体 4E10 (McAb4E10 ) ,它能特异识别血浆及内皮细胞的vWF ,将对相关血管性疾病的
|
| 关 键 词： | 血管性血友病因子 单克隆抗体 制备 生物学特性 间接ELISA 方法筛选 放射免疫方法 |
| 文章编号： | 1000-5749(2003)02-0137-05 |
| 修稿时间： | 2003年1月7日 |
Preparation and Characterization of Monoclonal Antibody Against Human Von Willebrand Factor |
| |
| SHAO Xiao-yan,SHEN Fei,RUAN Chang-geng,et al.Preparation and Characterization of Monoclonal Antibody Against Human Von Willebrand Factor[J].Suzhou University Journal of Medical Science,2003,23(2):137-141. |
| |
| Authors: | SHAO Xiao-yan SHEN Fei RUAN Chang-geng |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Von Willebrand Factor monoclonal antibody characterization |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
