首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
检索        

人IL-17F重组逆转录病毒载体的构建及其在293T细胞中的稳定表达
引用本文:谢宇锋,盛伟华,缪竞诚,杨吉成.人IL-17F重组逆转录病毒载体的构建及其在293T细胞中的稳定表达[J].苏州大学学报(自然科学版),2007,27(2):185-188.
作者姓名:谢宇锋  盛伟华  缪竞诚  杨吉成
作者单位:苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室 江苏苏州215123
摘    要:目的构建hIL-17F重组逆转录病毒载体并研究它在293T细胞中的表达。方法以测序验证的pUCm-T/hIL-17F为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增目的基因片段(包括20aa信号肽序列,而且hIL-17F基因内EcoR I酶切位点GAA T TC→GAA C TC同义点突变,即AA T→AA C,均为Asn),并正向插入逆转录病毒载体pSIV-1后经PCR、双酶切和测序鉴定。将构建正确的pSIV-1/hIL-17F与辅助病毒载体pHIT456和pHIT60混合后,采用脂质体法共转染293T包装细胞,获得具有感染能力的成熟重组逆转录病毒感染293T细胞,经G418筛选获得阳性细胞株,并应用PCR、RT-PCR和dot-ELISA法检测hIL-17F目的基因在293T细胞中的整合、转录和表达。结果成功构建了hIL-17F基因内EcoRI酶切位点GAA T TC→GAA C TC同义点突变的重组逆转录病毒载体pSIV-1/hIL-17F,并在293T细胞中稳定表达。结论以逆转录病毒为载体感染的稳定表达rhIL-17F的293T转基因细胞株的首次获得,为进一步研究hIL-17F的生物学功能及其机制奠定了良好的基础。

关 键 词:人白细胞介素-17F  逆转录病毒  293T细胞  稳定表达
文章编号:1673-0399(2007)02-0185-04
修稿时间:2006-05-18

Construction of Human IL-17F-recombinant Retrovirus Vector and Its Stable Expression in 293T Cells
XIE Yu-feng,SHENG Wei-hua,MIAO Jing-cheng,YANG Ji-cheng.Construction of Human IL-17F-recombinant Retrovirus Vector and Its Stable Expression in 293T Cells[J].Suzhou University Journal of Medical Science,2007,27(2):185-188.
Authors:XIE Yu-feng  SHENG Wei-hua  MIAO Jing-cheng  YANG Ji-cheng
Institution:Department of Cellular and Molecular Biology, Medical School, Suzhou University, Jiangsu Suzhou 215123, China
Abstract:
Keywords:human interleukin-17F  retrovirus  293T cell  stable expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号