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EB病毒gp85 N端片段的原核表达与初步鉴定
引用本文:涂向东,吴玉水,邱龙翔,连云宗,程烽,兰风华,朱忠勇.EB病毒gp85 N端片段的原核表达与初步鉴定[J].福州总医院学报,2008,15(1):22-24.
作者姓名:涂向东  吴玉水  邱龙翔  连云宗  程烽  兰风华  朱忠勇
作者单位:[1]福州总医院全军检验医学研究所 [2]漳州第175医院 [3]泉州市第一医院
摘    要:目的:构建EB病毒的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达;分析非搪基化的EB病毒包膜搪蛋白gps5N端截短片段的抗原性。方法:采用基因工程技术,以EB病毒B95—8细胞培养上清为模板,PCR扩增EB病毒的BXLF2基因N端片断。PCR产物经HindⅢ和xho Ⅰ双酶切,并插入原核表达载体pGEX-5T,构建pGEXST-85N重组表达质粒。在大肠杆菌BL21中诱导表达gp85N蛋白。纯化表达的蛋白进行蛋白免疫印迹鉴定,并免疫BALB/C小鼠。结果:序列分析表明。插入片段的序列与GenBank登录的参考序列完全—致。重组表达的蛋白的分子量约为45kD,与预期大小相符。可溶性重组蛋白纯化后免疫雕LuyC小鼠,经ELISA检测获得了高效价的多克隆抗体,且gp85单抗可识别所表达的gp85N抗原。Western blot结果显示,该抗原可与小鼠免疫血清起特异反应。结论:表达并纯化的EB病毒的截短gp85N重组蛋白具有良好的抗原性,为下一步分析所产生抗体的生物学特性提供条件。

关 键 词:Epstein—Barr病毒  gp85  表达  免疫原性

PROKARYOTIC EXPRESSION AND CHARACIERIZATION OF N-TERMINAL TRUNCATEDGLYCOPROTEIN GO85 OF EPSTEIN-BARR VIRUS
TU Xiang-dong WU Yu-shui QIU Long-xiang LIAN Yun-zong CHENG Feng LAN Feng-hua ZHU Zhong-yong Center for laboratory Medicine of Fuzhou General Hospital,Nanjing Military Area,Fuzhou.PROKARYOTIC EXPRESSION AND CHARACIERIZATION OF N-TERMINAL TRUNCATEDGLYCOPROTEIN GO85 OF EPSTEIN-BARR VIRUS[J].Journal of Fuzhou Genenal Hospital,2008,15(1):22-24.
Authors:TU Xiang-dong WU Yu-shui QIU Long-xiang LIAN Yun-zong CHENG Feng LAN Feng-hua ZHU Zhong-yong Center for laboratory Medicine of Fuzhou General Hospital  Nanjing Military Area  Fuzhou
Institution:TU Xiang-dong WU Yu-shui QIU Long-xiang LIAN Yun-zong CHENG Feng LAN Feng-hua ZHU Zhong-yong Center for laboratory Medicine of Fuzhou General Hospital,Nanjing Military Area,Fuzhou 350025,the 175 th hospital of PLA,Zhanghou 363000,the first hospital of Quanzhou,362000)
Abstract:
Keywords:Epstein-Barr virus  BXLF2 gene  Expression  Immnuno-genicity  
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