| siRNAi沉默DNMT1基因对肺癌细胞WIF-1启动子甲基化的影响 |
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| 引用本文： | 刘煜亮,王海晶,宫亮,唐春兰,杨和平.siRNAi沉默DNMT1基因对肺癌细胞WIF-1启动子甲基化的影响[J].重庆医学,2011,40(13). |
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| 作者姓名： | 刘煜亮 王海晶 宫亮 唐春兰 杨和平 |
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| 作者单位： | 第三军医大学西南医院呼吸科,重庆,400038 |
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| 摘 要： | 目的 探讨DNA甲基转移酶(DNMT1)siRNAi对人肺癌A549细胞内抑癌基因wnt抑制因子-1(WIF-1)基因启动子高甲基化的影响.方法 利用pSilencer 4.1-CMV neo载体,通过siRNAi表达载体法制备DNMT1 siRNAi.将DNMT1 siRNAi转染肺癌A549细胞,采用RT-PCR和Western blot检测观察转染前后肺癌A549细胞DNMT1内DNMT1基因的表达改变,并利用甲基化PCR,直接测序法检测WIF-1基因启动子甲基化水平.结果 构建的DNMT1 siRNAi转染肺癌A549细胞后,明显抑制DNMT1基因的表达,mRNA表达下降75%,蛋白表达下调82%;同时,WIF-1基因启动子序列较转染前甲基化水平明显降低.结论 靶向DNMT1的siRNAi可明显下调靶基因DNMT1的表达,并逆转WIF-1基因启动子高甲基化水平.
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| 关 键 词： | 基因 肺肿瘤 启动区遗传学 |
siRNAi targeted DNMT1 silence induces WIF-1 promoter hypomethylation |
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| Liu Yuliang,Wang Haijing,Gong Liang,Tang Chunlan,Yang Heping.siRNAi targeted DNMT1 silence induces WIF-1 promoter hypomethylation[J].Chongqing Medical Journal,2011,40(13). |
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| Authors: | Liu Yuliang Wang Haijing Gong Liang Tang Chunlan Yang Heping |
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