| 大鼠表皮基底层干细胞体外分离与培养 |
| |
| 引用本文： | 邓先见,姚波,李力,徐苗苗,顾玮,杨策,蒋建新.大鼠表皮基底层干细胞体外分离与培养[J].重庆医学,2013,0(21):2441-2443,2448. |
| |
| 作者姓名： | 邓先见 姚波 李力 徐苗苗 顾玮 杨策 蒋建新 |
| |
| 作者单位： | 邓先见 (第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室/全军交通医学研究所/创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042)； 姚波 (第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室/全军交通医学研究所/创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042)； 李力 (第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室/全军交通医学研究所/创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042)； 徐苗苗 (第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室/全军交通医学研究所/创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042)； 顾玮 (第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室/全军交通医学研究所/创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042)； 杨策 (第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室/全军交通医学研究所/创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042)； 蒋建新 (第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室/全军交通医学研究所/创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042)； |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目(81030037) |
| |
| 摘 要： | 目的建立简单、可靠的大鼠表皮基底层干细胞体外分离培养方法。方法取新生大鼠背部皮肤,采用胰酶两步消化法获得单细胞悬液,Ⅳ型胶原差速贴壁法富集干细胞,将慢黏附细胞作为对照组细胞,均以角质形成细胞无血清培养基培养。以β1-整合素和角蛋白19(K19)双重荧光染色鉴定细胞表型,克隆形成实验检测细胞体外增殖能力。结果分离培养的细胞为多角形、呈铺路石样排列,倍增时间约为24h,细胞形态和生长规律符合基底层干细胞的特征。免疫荧光鉴定显示细胞共表达β1-整合素和K19,基底层干细胞克隆形成能力显著强于对照细胞。结论两步消化联合Ⅳ型胶原差速贴壁法获取基底层干细胞简易可行,培养的细胞活力好、表型可靠。
|
| 关 键 词： | 成体干细胞 细胞培养技术 表皮干细胞 基底层干细胞 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
