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人趋化因子SLC在大肠杆菌中的表达与初步纯化
引用本文:罗福康,沈大斌,郑红,顾涛.人趋化因子SLC在大肠杆菌中的表达与初步纯化[J].重庆医学,2006,35(18):1638-1640.
作者姓名:罗福康  沈大斌  郑红  顾涛
作者单位:1. 第三军医大学,新桥医院检验科,重庆 400037
2. 第三军医大学,西南医院综合实验研究中心,重庆 400038
摘    要:目的确立人趋化因子SLC在大肠杆菌中的表达条件和初步纯化条件。方法将pET32a(+)/SLC分别转化大肠杆菌AD494(DE3)、BL21trxB(DE3)、BL21trxB(DE3)plusS.选择最佳宿主菌,优化诱导表达的条件,将大量表达的目的蛋白经金属离子亲和层析、除盐、肠激酶酶切、阳离子交换进行初步纯化。结果pET32a(+),SLC最佳宿主菌为BI。21trxB(DE3).优化的表达条件为37C、1mmol/LIPTG诱导3h,SDS-PAGE分析可见,表达蛋白的大小约为30kd,占菌体总蛋白的50%以上.可溶性蛋白约占50%。用SLC多克隆抗体进行Westernblm分析显示,在30kd处出现单一阳性条带,而对照的pET32a(+)/BL21trxB(DE3)诱导菌则无此反应。SLC经一系列纯化步骤得到初步纯化。结论初步建立pET32a(+)/SLC在宿主菌BL21trxB(DE3)中表达和纯化的方法。

关 键 词:融合蛋白  宿主菌  蛋白纯化  趋化因子  大肠杆菌
文章编号:1671-8348(2006)18-1638-03

Expression of human chemokine SLC in E.coli. and its primary purification
LUO Fu-kang,SHEN Da-bing,ZHENG Hong,et al..Expression of human chemokine SLC in E.coli. and its primary purification[J].Chongqing Medical Journal,2006,35(18):1638-1640.
Authors:LUO Fu-kang  SHEN Da-bing  ZHENG Hong  
Abstract:
Keywords:fusion protein  host strain  protein purification  chemokine  E  coli  Western Blot  
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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