| RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α对人乳腺癌细胞功能的影响 |
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| 作者姓名： | Wang H Liu YJ Han ZB Liang LH Lv LL Han ZC |
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| 作者单位： | 中国医学科学院,中国协和医科大学,血液学研究所泰达生命科技研究中心,天津,300020 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;天津市自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的研究靶向针对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的短发夹RNA(shRNA)对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞功能的影响。方法氯化钴模拟低氧环境。采用RNA干扰技术,构建针对HIF-1α的shRNA真核表达载体,转染MCF-7细胞。RT-PCR检测RNA干扰后MCF-7中血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化。实时定量PCR和Westernblot技术分别检测HIF-1αmRNA和蛋白质水平。Sub-G1测定、AnnexinⅤ荧光标记和DNAladder检测细胞凋亡。流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果缺氧后,MCF-7中的HIF-1α表达增加(P<0.01),而凋亡率较常氧降低(P<0.05)。shRNA转染MCF-7后,HIF-1α的表达下调91.63%(P<0.01)。阿糖胞苷诱导或无凋亡诱导剂时,干扰组凋亡率比未转染组分别增高1.75倍(P<0.01)和61.31倍(P<0.01)。与未转染组相比,干扰组中的VEGF下调66.8%(P<0.05)。干扰组细胞周期进程也较未转染组减缓。结论HIF-1α在MCF-7中发挥抗细胞凋亡的作用。本室构建的针对HIF-1α的shRNA能够促进MCF-7凋亡,下调VEGF表达,推迟细胞周期。
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| 关 键 词： | 缺氧诱导因子-1α 短发夹RNA 人乳腺癌细胞系 细胞凋亡 血管内皮生长因子 细胞周期 |
| 文章编号： | 1000-503X（2006）05-0670-05 |
| 收稿时间： | 2005-12-18 |
| 修稿时间： | 2005年12月18 |
Effect of silencing hypoxia-inducible factor-1 alpha by RNA interference on human breast carcinoma cell line |
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| Wang H,Liu YJ,Han ZB,Liang LH,Lv LL,Han ZC.Effect of silencing hypoxia-inducible factor-1 alpha by RNA interference on human breast carcinoma cell line[J].Acta Academiae Medicinae Sinicae,2006,28(5):670-674. |
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| Authors: | Wang Han Liu Yong-jun Han Zhi-bo Liang Lin-hui Lv Lu-lu Han Zhong-chao |
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| Institution: | TEDA Life Science and Technology Research Center, Institute of Hematology, CAMS and PUMC, Tianjin 300020, China |
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