| 用G418选择系统分离人肺腺癌细胞系癌基因 |
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| 引用本文： | 何申,王春景,杨力,王瑞瑜,董敏,刘惠英,韩代书,田竟生.用G418选择系统分离人肺腺癌细胞系癌基因[J].中国医学科学院学报,1989(3). |
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| 作者姓名： | 何申 王春景 杨力 王瑞瑜 董敏 刘惠英 韩代书 田竟生 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院基础医学研究所
(何申，王春景，杨力，王瑞瑜，董敏，刘惠英，韩代书)，北京市肿瘤防治研究所(田竟生) |
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| 摘 要： | 本研究用人肺腺癌细胞系AGZY-83-a(简称AGZY)的基因组DNA转染小鼠NIH3T3细胞系,同时加载有抗性标记的neo基因的质粒——pSV_2-neo DNA,进行共转染。用120万细胞,加AGZY DNA300μg,pSV2-neo DNA30μg;对照组则只加转染缓冲液HBS。然后,一半以二甲基亚砜短暂处理(DMSO休克)。全部培养基均加氨基糖苷型抗菌素(Geneticin,即G418)600μg/ml。4d后大部细胞逐渐死亡。对照组细胞于第9d全部死亡。再10d后,实验组陆续出现生长良好的集落(转化灶),总数达68个(来自休克与未休克组的细胞等量)。因此,pSV2-neo DNA的转化率约为68个/30μg/120万细胞或2.2/μg DNA/10~6
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