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阳离子脂法介导质粒转染大鼠骨髓基质干细胞用于基因修饰的细胞移植治疗
作者姓名:Zhang P  Zhang H  Hu SS  Chen LG  Wei YJ
作者单位:中国医学科学院,中国协和医科大学,阜外心血管病医院卫生部心血管疾病再生医学研究重点实验室,北京,100037
基金项目:国家自然科学基金,国家自然科学基金
摘    要:目的探讨阳离子脂转染方法在骨髓基质干细胞(BMSC)基因转染中的应用.方法通过梯度试验确定相对最佳的转染条件并测定LipofectamineTM2000(LP2000)介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染大鼠BMSC的瞬时转染效率;分析细胞周期对导入基因表达的影响;以流式细胞仪测定转基因BMSC的EGFP表达强度和阳性比例随时间的变化;将EGFP基因转染的大鼠BMSC注射法移植入同源大鼠心肌内,以逆转录PCR法检测心肌组织内EGFP基因的转录,荧光显微镜法检测EGFP阳性的BMSC.结果在不同转染条件下(DNA浓度、DNA:LP2000),LP2000介导EGFP基因转染大鼠BMSC的瞬时转染效率不同;通过阳离子脂法导入基因的表达效果受细胞周期制约;细胞移植后,能在大鼠心肌组织中检测到EGFP基因的转录以及表达EGFP基因的BMSC.结论阳离子脂可以作为基因修饰的细胞移植治疗的有效载体.为了提高基因转染的瞬时效率和基因的表达效率,降低毒性、满足转基因细胞移植的要求,尚需进一步的研究.

关 键 词:转染  骨髓基质于细胞  细胞移植  阳离子脂法
文章编号:1000-503X(2005)04-0504-05
收稿时间:2004-10-11
修稿时间:2004-10-11

Plasmid transfection of rat bone marrow mesenchymal stem cells by cationic lipid for gene-modified cell transplantation therapy
Zhang P,Zhang H,Hu SS,Chen LG,Wei YJ.Plasmid transfection of rat bone marrow mesenchymal stem cells by cationic lipid for gene-modified cell transplantation therapy[J].Acta Academiae Medicinae Sinicae,2005,27(4):504-508,i0004.
Authors:Zhang Peng  Zhang Hao  Hu Sheng-Shou  Chen Li-Guo  Wei Ying-Jie
Institution:Ministry of Health Key Laboratory of Cardiac Regeneration, Fuwai Hospital, CAMS and PUMC, Beijing 100037, China.
Abstract:
Keywords:transfection  bone marrow mesenchymal stem cell  cell implantation  cationic lipid
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