FuGNE6与pGPu6/GFP/neo-GPC3-iRNA质粒不同比率对HepG2细胞转染效率的影响 |
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引用本文: | 姜菲菲,赵焕英,隋雷鸣,绳波,徐萌,李莉.FuGNE6与pGPu6/GFP/neo-GPC3-iRNA质粒不同比率对HepG2细胞转染效率的影响[J].山西医科大学学报,2015(1):25-27,100. |
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作者姓名: | 姜菲菲 赵焕英 隋雷鸣 绳波 徐萌 李莉 |
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作者单位: | 首都医科大学北京佑安医院临床检验中心;首都医科大学医学实验与测试中心 |
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基金项目: | 首都医科大学校基金技术类资助项目(2014JS08,2014JS06);首都医科大学基础临床科研合作基金资助项目(13JL28) |
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摘 要: | 目的探讨转染试剂FuGNE6与pGPu6/GFP/neo-GPC3-iRNA质粒不同比率对HepG2细胞转染效率的影响,并寻找最佳的转染比例。方法采用转染试剂FuGNE6(以6μl为例)与GPC3-iRNA质粒(μg)比率分别为6∶0.5,6∶1,6∶1.5,6∶2,6∶4,6∶6及GPC3-iRNA量固定1μg(以此为例),转染试剂与GPC3-iRNA质粒(μg)比率分别为2∶1,4∶1,6∶1,8∶1,10∶1进行转染。分别用荧光显微镜、流式细胞仪及PI染色实验观察细胞转染效率及48h细胞存活率。结果FuGNE6固定为6μl时,质粒用量从0.5-2μg转化效率逐步增高,超过2μg后转染效率反而大大降低,各比例组在48h细胞存活率都在95%以上;质粒量固定为1μg时,随转染试剂增加转化效率不断增大,超过6∶1时,随转染试剂增加,48h细胞存活率也逐渐下降。结论FuGNE6与GPC3-iRNA比例为6∶1.5时转化效率最大,且细胞存活率高。
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关 键 词: | 转染 FuGENE6 HepG2细胞 |
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