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弓形虫SAG1基因功能片段的克隆、表达与抗原性分析
引用本文:张建伟,王海龙,殷国荣,刘转转,刘晋平,赵丰.弓形虫SAG1基因功能片段的克隆、表达与抗原性分析[J].山西医科大学学报,2009,40(6):481-484.
作者姓名:张建伟  王海龙  殷国荣  刘转转  刘晋平  赵丰
作者单位:1. 山西医科大学医学寄生虫学研究所、寄生虫学教研室,太原,030001;山西农业大学动物科技学院
2. 山西医科大学医学寄生虫学研究所、寄生虫学教研室,太原,030001
3. 山西农业大学动物科技学院
4. 山西医科大学第一临床医学院
摘    要:目的 重组、表达与纯化弓形虫速殖子主要表面抗原1(SAG1)具有生物活性的功能多肽,分析其抗原性.方法 根据SAG1的基因序列设计引物,截除其前端的信号肽和后端的疏水区,只扩增650 bp的功能区域;将该片段重组入带有His标签的pET-30a(+)质粒,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其在E.coli中表达,调整诱导表达时间、IPTG浓度等条件,高效稳定地表达出目的 蛋白;镍柱亲和层析法纯化目的 蛋白,Western-blot检验纯化后蛋白的抗原性.结果 成功构建pET-30a(+)/SAG1重组质粒,使其在E.coli中高效稳定地可溶性表达,并确定出在0.5 mmol/L IPTG浓度下诱导12 h为最佳表达条件,Western-blot显示纯化后的蛋白具有良好的抗原性.结论 获得了可溶性的弓形虫SAG1基因功能片段表达的产物,其具有良好的抗原性.

关 键 词:弓形虫  原核表达  蛋白纯化  抗原性

Cloning,expression and antigenicity analysis of gene encoding the major surface antigen 1 function of Toxoplasma gondii
ZHANG Jian-wei,WANG Hai-long,YIN Guo-rong,LIU Zhuan-zhuan,LIU Jin-ping,ZHAO Feng.Cloning,expression and antigenicity analysis of gene encoding the major surface antigen 1 function of Toxoplasma gondii[J].Journal of Shanxi Medical University,2009,40(6):481-484.
Authors:ZHANG Jian-wei  WANG Hai-long  YIN Guo-rong  LIU Zhuan-zhuan  LIU Jin-ping  ZHAO Feng
Abstract:
Keywords:SAG1
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