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| 人致病性呼肠孤病毒M3编码蛋白纯化及多克隆抗体制备 | |
| 引用本文： | 陈江曼,李永刚,王佳美,佟伟,任雨舒,李新. 人致病性呼肠孤病毒M3编码蛋白纯化及多克隆抗体制备[J]. 中国现代医学杂志, 2016, 26(18): 18-21 |
| 作者姓名： | 陈江曼 李永刚 王佳美 佟伟 任雨舒 李新 |
| 作者单位： | 1.锦州医科大学，辽宁 锦州 121000；2.锦州医科大学附属第二医院，辽宁 锦州 121000 |
| 基金项目： | 辽宁医学院领军人物人畜共患病创新团队（No：173615007）；锦州医科大学校长基金-奥鸿博泽研究生科技创新基金（No：AH2015020） |
| 摘 要： | 目的 根据构建的人致病性纳尔逊海湾病毒（NBVs）M3基因片段质粒，纯化融合蛋白制备NBVs M3多克隆抗体。方法 利用构建的纳尔逊海湾病毒（NBVs）M3基因质粒Pris His MB-M3，转化至大肠埃希菌（E.coil）BL21（DE3）感受态细胞中，异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导蛋白表达，产物经过镍柱亲和层析法获得Pris His MB-M3融合蛋白；将纯化的融合蛋白作为抗原免疫家兔，获得NBVs M3多克隆抗体；蛋白免疫印迹检测（Western blot）蛋白准确性以及多克隆抗体抗性。结果 SDS-PAGE电泳考马斯亮蓝染色检测显示：25℃、IPTG浓度为0.3 mmol/L，诱导12 h，Pris His MB-M3融合蛋白表达量最高；在咪唑浓度为MCAC-20、MCAC-40条件时洗脱下目的蛋白。用纯化的融合蛋白免疫家兔制备抗体，Western blot验证成功制备出NBVs M3多克隆抗体。结论 成功获得了灵敏性及特异性较高的纳尔逊海湾病毒（NBVs）M3多克隆抗体，为进一步研究该病毒的致病性提供了很高的应用价值。 |
| 关 键 词： | Pris His MB-M3质粒；纳尔逊海湾病毒（NBVs)；纯化蛋白；多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2016-04-15 |
Purification of human pathogenic reovirus M3 gene encoded protein and preparation of its polyclonal antibody |
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| Jiang-man Chen,Yong-gang Li,Jia-mei Wang,Wei Tong,Yu-shu Ren,Xin Li. Purification of human pathogenic reovirus M3 gene encoded protein and preparation of its polyclonal antibody[J]. China Journal of Modern Medicine, 2016, 26(18): 18-21 | |
| Authors: | Jiang-man Chen Yong-gang Li Jia-mei Wang Wei Tong Yu-shu Ren Xin Li |
| Affiliation: | 1. Jinzhou Medical University, Jinzhou, Liaoning 121000, China; 2. The Second Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University, Jinzhou, Liaoning 121000, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Pris His MB-M3 plasmid Nelson Bay orthoreoviruses (NBVs) purified protein polyclonal antibody |
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