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| 比格犬ERβ剪切异构体ERβ419沉默表达载体的构建及筛选 | |
| 作者姓名： | 甘艺 赵彦斌 陈福军 孙兆增 胡仲明 刘冰 杨焕民 曾林 |
| 作者单位： | 军事医学科学院实验动物中心 |
| 基金项目： | 比格犬雌激素β受体剪切异构体ERβ419、ERβ431在雌激素反应信号中的 作用机理研究 |
| 摘 要： | 目的构建最有效的慢病毒介导RNAi干扰序列,未来将应用于比格犬ERβ419的未知生物学功能的探索。方法模拟比格犬ERβ419靶细胞筛选针对目的基因mRNA设计的最佳干扰序列实验,通过qRT-PCR和Western Blot技术筛选最佳沉默表达载体序列。结果qRT-PCR结果显示,ERβ419-shRNA1(P0.01)和ERβ419-shRNA3(P0.01)的差异表达极显著,Western Blot结果与qRT-PCR结果一致,ERβ419-shRNA3的干扰效果最佳。结论 ERβ419-shRNA3最有效地抑制了目的基因的表达,未来将应用于探索比格犬ERβ419未知生物学功能对比格犬生殖系统影响的研究,并进而预防和治疗比格犬繁殖机能障碍性疾病。 |
| 关 键 词： | 比格犬ERβ 稳定表达细胞系 基因沉默 |
| 修稿时间： | 2014-10-22 |
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