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猕猴结核分枝杆菌PCR检测方法的建立与初步应用
引用本文:罕园园,高家红,罗志武,匡德宣,陆彩霞,代解杰.猕猴结核分枝杆菌PCR检测方法的建立与初步应用[J].中国比较医学杂志,2008,18(9).
作者姓名:罕园园  高家红  罗志武  匡德宣  陆彩霞  代解杰
作者单位:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所,昆明,650118
摘    要:目的建立猕猴结核分枝杆菌PCR快速检测方法。方法根据GenBank中报道的人型结核分枝杆菌标准株H37RV全基因序列,针对其中致病性结核分枝杆菌所特有的保守区域ESAT-6设计一对引物进行TouchdownPCR反应,利用此方法对100份野生来源猕猴全血标本进行检测,并与传统的PPD实验和咽拭子抗酸染色实验结果作比对。结果抽取33份野生来源猕猴的外周血,提取DNA进行扩增,扩增片段经纯化、回收克隆测序后用BLAST软件进行同源性对比,与GenBank中报道的序列基本相同,检测标本中有4份(4/33)为阳性,其中3份(3/33)标本与结核菌素试验和咽拭子抗酸染色试验结果相符合。结论建立了从猴全血中直接检测猴结核分枝杆菌DNA的TouchdownPCR方法,具有敏感性和特异性高,且简便的优点。

关 键 词:结核分枝杆菌  降落PCR  猕猴

Establishment of Touchdown PCR Method for Detection of Mycobacterium from Rhesus monkey and Its Preliminary Application
HAN Yuan-yuan,GAO Jia-hong,LUO Zhi-wu,KUAN De-xuan,LU Cai-xi,DAI Jie-jie.Establishment of Touchdown PCR Method for Detection of Mycobacterium from Rhesus monkey and Its Preliminary Application[J].Chinese Journal of Comparative Medicine,2008,18(9).
Authors:HAN Yuan-yuan  GAO Jia-hong  LUO Zhi-wu  KUAN De-xuan  LU Cai-xi  DAI Jie-jie
Abstract:
Keywords:
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