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兔抗五种鱼免疫球蛋白抗体的制备和HRP标记
引用本文:林树柱,李万波,刘先菊,杨帆,秦川,张连峰.兔抗五种鱼免疫球蛋白抗体的制备和HRP标记[J].中国比较医学杂志,2008,18(5):45-49.
作者姓名:林树柱  李万波  刘先菊  杨帆  秦川  张连峰
作者单位:中国医学科学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021
基金项目:科技部科研院所技术开发研究专项基金
摘    要:目的制备兔抗鱼类免疫球蛋白抗体并进行辣根过氧化酶标记,为鱼类血清学检测系统的建立提供工具。方法利用proteinA亲和层析的方法纯化鱼血清免疫球蛋白,免疫大耳白兔制备抗血清,利用免疫双扩散来检测抗血清的效价,并用Protein A亲和层析的方法来纯化兔抗鱼免疫球蛋白的抗体,采用简易过碘酸钠法对纯化的兔抗鱼免疫球蛋白的抗体进行HRP标记,通过ELISA方法测定标记抗体的效价,并利用Western blotting来考察标记抗体与其他常见鱼类血清蛋白间的交叉反应。结果纯化了鳙、鲤、乌鳢、黄鳝、鲈五种鱼血清免疫球蛋白,免疫双扩散法测定兔抗这五种鱼免疫球蛋白的抗血清效价均达到1∶32,并对纯化的兔抗鳙、鲤、乌鳢、黄鳝、鲈五种鱼类免疫球蛋白的抗体进行了HRP标记,ELISA测定标记抗体的效价达到1∶10000左右,Western blots显示标记抗体与部分其他鱼类免疫球蛋白之间存在不同程度的交叉反应。结论成功制备了HRP标记的兔抗鱼类免疫球蛋白抗体,为鱼类血清学检测体系的建立提供了工具。

关 键 词:  免疫球蛋白    HRP  兔抗  免疫球蛋白抗体  Antibodies  Immunoglobulins  Rabbit  Labeling  检测体系  程度  存在  显示  抗血清效价  免疫双扩散法  黄鳝  乌鳢  结果  交叉反应  血清蛋白  考察  Western  blotting
文章编号:1671-7856(2008)05-0045-05

Production and HRP Labeling of Rabbit Anti-fish Immunoglobulins Antibodies
LIN Shu-zhu,LI Wan-be,LIU Xian-ju,YANG Fan,QIN Chuan,ZHANG Lian-feng.Production and HRP Labeling of Rabbit Anti-fish Immunoglobulins Antibodies[J].Chinese Journal of Comparative Medicine,2008,18(5):45-49.
Authors:LIN Shu-zhu  LI Wan-be  LIU Xian-ju  YANG Fan  QIN Chuan  ZHANG Lian-feng
Abstract:
Keywords:
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