大鼠骨髓间质干细胞定向分化为神经元的实验研究

【目的】研究体外培养骨髓来源的表达nestin的成年大鼠骨髓间质干细胞（MSC）并诱导分化神经元样细胞的潜能，为中枢神经系统疾病的细胞移植治疗提供理想的供体。【方法】采用全骨髓法分离培养成年SD大鼠MSC，传至第6代的MSC接种在前一天涂有100ug／L多聚赖氨酸的塑料培养瓶或培养皿中，用含100mL／LFBS的DMEM／F12培养液添加10ng／mLbFGF的培养液培养并以DMSO、BHA与Forskolin等诱导剂联合诱导MSC分化为神经元。流式细胞仪鉴定诱导前MSC的细胞表面抗原，免疫荧光检测诱导前及诱导后6h、12h、24h神经元特异性抗原nestin、NF-200和GFAP表达率。【结果】流式细胞仪检测传至第6代MSC表面抗原CD29和CD44阳性率分为98．8％，96．6％，CD34和CD45阴性。免疫荧光鉴定传至第6代的MSC表达nestin阳性率为57．1％±6．9％，不表达NF-200和GFAP。诱导后30min可见神经元样细胞出现，诱导后6h、12h、24h经nestin和NF．200免疫荧光鉴定，诱导后6h、12h、24hnestin阳性率分别为96．5％±1．9％，88．1％±5．4％，33．5％±5．4％，NF-200阳性率分别为90．1％±2．9％，97．5％±1．3％，98．1％±1．6％。【结论】骨髓来源的nestin阳性的MSC具有神经祖细胞特性并且可诱导分化为神经元样细胞，可作为种子细胞用于神经系统疾病的治疗。