NADPH氧化酶介导的ROS在特发性炎性肌病动物模型骨骼肌组织中的表达及意义

目的 探讨NADPH氧化酶中的NOX2和NOX4介导的活性氧（ROS）在特发性炎性肌病（IIM）发病机制中的作用及意义。方法将14只健康雌性BALB/c小鼠随机分为对照组（n=6)和EAM组（n=8），EAM组小鼠采用豚鼠骨骼肌匀浆蛋白免疫诱导实验性自身免疫性肌炎动物模型。观察小鼠的体重变化、临床表现，测定其血清肌酶水平、四肢肌力及骨骼肌组织病理改变；并采用免疫组织化学法、分光光度法和ELISA法分别检测各组小鼠骨骼肌组织中NOX2、NOX4、NADPH及ROS的表达情况或含量。结果 与对照组相比，末次免疫后1周EAM组小鼠体重下降，差异有统计学意义（P＜0.05）。HE染色结果显示，对照组小鼠骨骼肌纤维大小、形态、结构基本正常，有少量炎性细胞浸润，未见肌纤维萎缩、变性、坏死；EAM组小鼠骨骼肌纤维大小不一、粗细不等，有大量炎性细胞浸润，可见不同程度的萎缩、变性、坏死；EAM组小鼠骨骼肌组织HE染色病理学评分显著高于对照组（P＜0.05）。与对照组相比，EAM组小鼠骨骼肌组织中NADPH含量降低、ROS含量升高（P＜0.05）。免疫组化染色结果显示，NOX2和NOX4在EAM组小鼠骨骼肌组织中的表达均高于对照组（P＜0.05）。Pearson相关分析结果显示，EAM组小鼠骨骼肌组织中ROS的含量与NOX2、NOX4的免疫组化评分均呈正相关（P＜0.05），而与NADPH的含量呈负相关（P＜0.05）；EAM组小鼠骨骼肌组织HE染色病理学评分与NOX2、NOX4的免疫组化评分及ROS的含量均呈正相关（P＜0.05），而与NADPH的含量呈负相关（P＜0.05）。结论 NADPH氧化酶中的NOX2和NOX4可能通过消耗NADPH产生大量的ROS，导致组织细胞氧化性损伤并诱导铁死亡反应来参与IIM的发病；NADPH、NOX2、NOX4和ROS有望成为新的评价IIM肌肉组织损伤程度的指标。

Expression and significance of ROS mediated by NADPH oxidases in skeletal muscle tissues of animal model of idiopathic inflammatory myopathy