培美曲塞对人肺腺癌HCC827细胞株PD-L1表达的影响及作用机制

【摘要】 目的 探讨培美曲塞(Pem)通过PI3K/AKT通路对人肺腺癌HCC827细胞株PD-L1表达的影响及其可能的作用机制。方法 分别采用不同浓度的Pem（0、0.01、0.1、1、10、100 μmol/L）在不同时间下（12、24、48h）处理HCC827细胞， CCK-8法检测细胞的增殖抑制作用及确定半数抑制浓度（IC50）作为后续实验的药物浓度，选最佳作用时间作为后续实验的干预时间；流式细胞术检测最佳时间下不同浓度的Pem对PD-L1的表达影响；试验分组：对照组（加入培养液）和试验组（IC50pem与PI3K/AKT通路激活剂740-YP分别单用或联用)，Western Blotting 检测各组AKT、P-AKT蛋白表达情况；流式细胞术检测最佳时间下各组对HCC827细胞株PD-L1表达的影响。结果 与对照组比较，Pem呈浓度依赖性抑制HCC827细胞增殖（P＜0.05），各组差异均有统计学意义（均P＜0.05），培养曲塞48h组抑制作用强于12 h组（P＜0.05），与24h组抑制率无明显差别(P＞0.05）。随着药物浓度增加，各实验组细胞PD-L1表达逐渐下降，显著低于对照组（P＜0.05）；与对照组比较，Pem组可明显下调P-AKT/GAPDH值以及PD-L1的表达（P＜0.05），该作用可被740 YP显著逆转（P＜0.05），各组AKT/GAPDH值差异均无统计学意义（P＞0.05）。与对照组相比，PD-L1表达量在740-YP组上调（P＜0.05），在IC50pem组、IC50pem+740-YP组中表达量降低(P＜0.05），且IC50pem组的PD-L1表达量低于IC50pem+740-YP组（P＜0.05）。 结论 Pem可下调HCC827细胞PD-L1的表达，其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。