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重组慢病毒载体pLKO-1-EGFP-puro的构建
引用本文:宋波,韩志强,吴少璞,刘景伟,蔡晓辉,杨靖,许予明.重组慢病毒载体pLKO-1-EGFP-puro的构建[J].郑州大学学报(医学版),2010,0(6).
作者姓名:宋波  韩志强  吴少璞  刘景伟  蔡晓辉  杨靖  许予明
作者单位:郑州大学第一附属医院神经内科,郑州,450052
基金项目:河南省教育厅自然科学基础研究计划基金
摘    要:目的:构建具有绿色荧光蛋白(GFP)标记及嘌呤霉素(puro)抗性的重组慢病毒载体。方法:改建慢病毒载体质粒pLKO-1-puro的多克隆位点(MCS),以质粒pEGFP-C3为模板扩增出CMV-EGFP并与pLKO-1-puro连接,形成重组的慢病毒载体质粒pLKO-1-EGFP-puro,后者与包装质粒Δ8.2和包膜蛋白质粒VSV-G在293T细胞中进行包装,产生重组慢病毒颗粒,感染非洲绿猴肾细胞Vero细胞,观察GFP的表达。结果:成功改建了慢病毒载体质粒pLKO-1-puro并插入了CMV-EGFP,形成了新型慢病毒载体质粒pLKO-1-EGFP-puro。3质粒共转染293T细胞产生的重组慢病毒颗粒感染Vero细胞后高表达绿色荧光。结论:成功构建了高效的带GFP报告基因及嘌呤霉素抗性的慢病毒载体。

关 键 词:神经系统遗传病  慢病毒载体  绿色荧光蛋白  嘌呤霉素抗性

Construction of a noval lentiviral vector pLKO-1-EGFP-puro
SONG Bo , HAN Zhiqiang , WU Shaopu , LIU Jingwei , CAI Xiaohui , YANG Jing , XU Yuming.Construction of a noval lentiviral vector pLKO-1-EGFP-puro[J].Journal of Zhengzhou University: Med Sci,2010,0(6).
Authors:SONG Bo  HAN Zhiqiang  WU Shaopu  LIU Jingwei  CAI Xiaohui  YANG Jing  XU Yuming
Abstract:
Keywords:neurological genetic disease  lentiviral vector  green fluorescent protein  puromycin resistance
本文献已被 万方数据 等数据库收录!
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