8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞DNA polβ基因及相关基因表达的影响 |
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作者姓名: | 李士坤 郑乃刚 吴景兰 白经修 董子明 |
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作者单位: | 1. 郑州大学第二附属医院消化疾病研究所,郑州,450000 2. 郑州大学基础医学院病理生理学教研室,郑州,450052 3. 郑州大学分子细胞生物学研究中心,郑州,450052 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 39870287 |
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摘 要: | 目的探讨8-Br-cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca-109细胞DNA polβ基因及相关基因表达的影响.方法将培养的Eca-109细胞分为3组①加8-Br-cAMP组(Br组);②加槲皮素组(Q组);③不加任何药物对照组(C组).同时培养48 h,将野生型DNA polβ的cDNA, EGFR cDNA,野生型(wt) p53 cDNA及c-myc cDNA分别制备了生物素/地高辛标记的探针进行原位杂交和RNA斑点印迹阵列.另进行POLB,XRCC1,VEGF及PCNA的免疫组化染色及免疫斑点印迹阵列.结果Br组和Q组的DNA polβ,EGFR,c-myc基因表达下调而wtp53基因表达上调.POLB,XRCC1,PCNA及VEGF免疫斑点印迹减弱.8-Br-cAMP及槲皮素显著下调Eca-109细胞的DNA polβ基因表达及相关癌基因表达,同时上调抑癌基因的表达.作为POLB的异二聚体XRCC1及恶性细胞生物标志的PCNA及VEGF表达下调.结论分化诱导剂下调Eca-109细胞DNA polβ基因表达,提示Eca-109细胞的polβ基因是高表达的;功能调整后的polβ通过相关基因表达的改变尤其是wt p53基因表达的上调在癌细胞分化中可能起重要作用.
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关 键 词: | DNA聚合酶β 基因表达 Eca-109细胞 8-Br-cAMP 槲皮素 |
修稿时间: | 2003-02-20 |
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