氯碘羟喹对β-淀粉样蛋白聚集影响的体外研究

目的：考察氯碘羟喹（clioquinol，CQ）在体外对β-淀粉样蛋白（β-amyloid，Aβ）聚集的影响以及这种作用是否与金属离子Zn2＋相关。方法采用硫黄素T（thioflavin，Th-T）结合实验检测聚集态Aβ；采用全波长吸收光谱扫描和竞争结合实验排除Th-T结合实验中可能存在的假阳性因素；采用圆二色谱检测Aβ的β-折叠。结果 CQ直接与单体态Aβ或聚集态Aβ共孵育24 h后均能明显降低Th-T的荧光强度；全波长吸收光谱扫描显示CQ在450 nm和485 nm附近均无特异性吸收峰；竞争结合实验表明，增加Th-T无法使体系的荧光强度恢复到最大；圆二色谱扫描结果表明，CQ可抑制Aβ的β折叠形成。 CQ影响Aβ聚集的量效关系研究表明，单体态Aβ与CQ孵育时，其抑制Aβ聚集的IC50值在无Zn2＋和含Zn2＋体系中分别为6.1和4.3μmol/L；在已聚集的Aβ体系中，其解聚Aβ的IC50值在无Zn2＋和含Zn2＋体系中分别为7.5和6.1μmol/L。结论 CQ可直接抑制Aβ聚集，并使已聚集的Aβ解聚，且在pH为6.6条件下，实验体系中的Zn2＋对CQ抗Aβ聚集的能力没有明显影响。