巨噬细胞表型转换对系统性硬化症胞葬功能的调控机制研究

目的 探究巨噬细胞表型转换调控胞葬功能对系统性硬化症发生发展的影响。方法 选取健康BALB/c雌性小鼠80只，随机分为空白对照组(40只)、系统性硬化症模型组(40只)。空白对照组背部注射生理盐水0.1 mL/(200 g·d)，系统性硬化症模型组背部注射博来霉素0.1 mL/(200 g·d)，取皮肤组织进行苏木素-伊红(hematoxylin and eosin，HE)染色评价病情进展，流式细胞术检测鼠心包血细胞表面B1型清道夫受体(scavenger receptor class B1，SR-B1)、A1清道夫受体(scavenger receptor class A1，SR-A1)和整合素β5(Integrin beta-5，ITGβ5)的表达水平，RT-PCR检测巨噬细胞极化因子可诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)、精氨酸酶-1(arginase-1，Arg-1)的mRNA水平；ELISA法检测血清炎症因子白细胞介素-17(Interleukin-17，IL-17)、白细胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor alpha，TNF-α)、基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9，MMP-9)、转化生长因子β1(Transforming growth factor beta-1，TGF-β1)及胞葬桥连分子生长抑制特异性蛋白6(Growth arrest-specific 6，GAS6)、乳脂球-表皮生长因子结合因子8(Milk fat globule-EGF factor 8，MFG-E8)的表达。提取原代骨髓来源巨噬细胞，采用流式细胞术检测巨噬细胞胞葬能力(phagocytosis index，PI)。结果 注药后第7、14、21、28天，与空白对照组比较，HE染色显示系统性硬化症模型组小鼠背部表皮厚度明显增加(P＜0.05)，且模型组的皮脂腺、毛囊等皮肤附属器明显减少，脂肪层被纤维组织包绕；模型组与空白组相比，皮肤组织中M1型巨噬细胞极化标志物iNOS的mRNA表达上调、M2型巨噬细胞极化标志物Arg-1的mRNA表达下调，血清IL-17、IL-6、TNF-α、MMP-9、TGF-β1等炎症因子表达水平上调(P＜0.05)，胞葬桥连分子(GAS6、MFG-E8)表达下调(P＜0.05)，清道夫受体(SR-B1、SR-A1、ITGβ5)及PI表达下调。结论 巨噬细胞向M1型表型转换与巨噬细胞胞葬功能下降呈正相关，可能共同导致了系统性硬化症的炎症反应和疾病进展。

Study on the Regulatory Mechanism of Macrophage Phenotype Transformation on Efferocytosis in Systemic Sclerosis