| 轮状病毒VP4蛋白酶切片段VP5*、VP8*在原核系统中的表达 |
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| 引用本文： | 金琳琳,李鹏,万言珍,岳盈盈,李志会,孟红.轮状病毒VP4蛋白酶切片段VP5*、VP8*在原核系统中的表达[J].滨州医学院学报,2008,31(3):165-168. |
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| 作者姓名： | 金琳琳 李鹏 万言珍 岳盈盈 李志会 孟红 |
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| 作者单位： | 山东省医学科学院基础医学研究所,济南市,250062;山东省医学科学院基础医学研究所,济南市,250062;山东省医学科学院基础医学研究所,济南市,250062;山东省医学科学院基础医学研究所,济南市,250062;山东省医学科学院基础医学研究所,济南市,250062;山东省医学科学院基础医学研究所,济南市,250062 |
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| 摘 要： | 目的克隆表达轮状病毒结构蛋白VP4酶切片段VP5＊、VP8＊。方法以猴轮状病毒SA11株细胞培养物提取总RNA为模板，经RT—PCR方法获得VP5＊、VP8＊全长基因片段cDNA，将其重组于pET-30a表达载体，转化大肠杆菌BL21（plyss），异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达，表达产物做SDS—PAGE和Western—blotting检测，目的产物用镍柱纯化。结果①重组载体在IPTG诱导下，工程菌表达的两个目的蛋白主要以包涵体形式存在；②SDS—PAGE检测表达产物与目的蛋白大小一致，VP5＊为60kD，VP8＊为28kD，Western—blotting检测发现两目的蛋白所带标签可与抗体反应；③镍柱纯化获得RVSA11VP5＊、VP8＊蛋白，纯度达90％。结论①构建表达载体pET-30a—VP5＊、pET-30a—VP8。；②表达、纯化VP4蛋白的VP5＊、VP8＊片段。
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| 关 键 词： | RV SA11 VP5* VP8* 原核表达 |
Prokaryotic expression of protein VP5*,VP8*of rotavirus SA11 |
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