| Brevican基因敲除小鼠的制备 |
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| 引用本文： | 韩晞,董艳.Brevican基因敲除小鼠的制备[J].第二军医大学学报,2011,32(8):818-822. |
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| 作者姓名： | 韩晞 董艳 |
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| 作者单位： | 1. 复旦大学附属华山医院神经外科,上海,200040
2. 第二军医大学长征医院神经外科,上海,200003 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 30571912 |
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| 摘 要： | 目的制备brevican基因敲除小鼠。方法采用ET克隆方法,构建brevican打靶载体。线性化打靶载体,电转化胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES),将正确同源重组的ES细胞注射入囊胚腔,生育嵌合体,再交配繁育杂合子及纯合子。PCR法鉴定小鼠的基因型。结果将PGK启动子指导的NEO表达框敲进Bcan第3外显子,敲除第3～8外显子序列,得到打靶载体,上游臂为2.4 kb,下游臂为4.8 kb。基因打靶后,得到双臂均发生正确同源重组的克隆数14个。利用阳性ES细胞克隆注射入囊胚,得到3只嵌合率大于50%的雄鼠,繁育得到6只Brevican-/-纯合子小鼠。结论利用同源重组方法,成功敲除干细胞靶基因,建立Brevican-/-建系小鼠。
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| 关 键 词： | brevican 基因敲除小鼠 胚胎干细胞 同源重组 |
| 收稿时间： | 2011/5/13 0:00:00 |
| 修稿时间： | 7/6/2011 12:01:14 AM |
Generation of brevican knockout mice |
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| HAN Xi and DONG Yan.Generation of brevican knockout mice[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2011,32(8):818-822. |
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| Authors: | HAN Xi and DONG Yan |
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| Institution: | Department of Neurosurgery,Changzheng Hospital,Second Military Medical University |
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| Abstract: | ObjectiveTo generate brevican knockout mutant mice. MethodsThe targeting construct to inactivate the brevican gene was made by using the ET cloning technology. The construct was linearized and electroporated into embryonic stem (ES) cells. Homologous reco |
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| Keywords: | Brevican gene knockout mouse embryonic stem cell homologous recombination |
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