| hVEGF165和嵌合水蛭肽融合基因的真核表达载体的构建及其表达 |
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| 引用本文： | 陈少萍,沈雳,秦永文,蔡在龙.hVEGF165和嵌合水蛭肽融合基因的真核表达载体的构建及其表达[J].第二军医大学学报,2005,26(9):983-987. |
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| 作者姓名： | 陈少萍 沈雳 秦永文 蔡在龙 |
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| 作者单位： | 1. 第二军医大学长海医院心内科,上海,200433
2. 基础医学部生物化学与分子生物学教研室,上海,200433 |
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| 摘 要： | 目的:克隆hVEGF165和嵌合水蛭肽(fused hirudin,FH)融合基因,构建hVEGF165-FH/pcDNA3.0基因表达载体,并在人内皮细胞株中表达.方法:分别通过PCR法扩增hVEGF165和引物退火法合成FH基因,将融合基因插入表达载体pcDNA3.0,构建重组质粒hVEGF165-FH/pcDNA3.0.对重组质粒进行酶切鉴定和测序分析,将正确克隆的质粒分别作体外快速转录翻译鉴定,以及经脂质体介导转染人内皮细胞株,并对表达产物进行鉴定.结果:hVEGF165和FH成功融合,形成711 bp的目的片段,并成功构建重组质粒hVEGF165-FH/pcDNA3.0,重组质粒转染人内皮细胞株有hVEGF165-FH表达.结论:重组质粒hVEGF165-FH/pcDNA3.0在人内皮细胞株中得到表达,为其融合蛋白活性研究及基因治疗打下良好基础.
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| 关 键 词： | 水蛭肽 基因融合 基因表达 载体 |
| 文章编号： | 0258-879X（2005）09-0983-05 |
| 收稿时间： | 2005-02-21 |
| 修稿时间： | 2005-04-15 |
Construction of a eukaryotic expression vector hVEGF165-fused hirudin/pcDNA3.0 and its expression |
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| CHEN Shao-ping,SHEN Li,QIN Yong-wen,CAI Zai-long.Construction of a eukaryotic expression vector hVEGF165-fused hirudin/pcDNA3.0 and its expression[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2005,26(9):983-987. |
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| Authors: | CHEN Shao-ping SHEN Li QIN Yong-wen CAI Zai-long |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hVEGF165 |
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