| 新西兰兔骨髓间充质干细胞-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系的构建及体外评价 |
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| 引用本文： | 沈锋,康一凡,扶晓明,唐昊.新西兰兔骨髓间充质干细胞-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系的构建及体外评价[J].第二军医大学学报,2013,34(5):482-487. |
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| 作者姓名： | 沈锋 康一凡 扶晓明 唐昊 |
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| 作者单位： | 1. 第二军医大学长海医院骨科,上海,200433
2. 解放军169中心医院骨科,衡阳,421000 |
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| 基金项目： | 上海市自然科学基金(10411960400). |
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| 摘 要： | 目的构建新西兰兔骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells,BMSCs）-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系,研究BMSCs的生长和分化情况。方法分别构建BMSCs-藻酸钙三维培养体系（W组）及BMSCs-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系（U组）,在37℃、饱和湿度、5%CO2培养箱内培养,培养液为高糖DMEM（含15%胎牛血清、10ng/mL转化生长因子β1）,隔日换液,观察细胞形态变化及凝珠形态变化。第2、4、6周对凝珠进行H-E染色、甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原染色。结果两组三维凝珠培养第10天局部有细胞团簇形成;第21天可见大量细胞团簇形成,BMSCs多保持圆球形或类球形。两组细胞增殖及生长能力差异无统计学意义（P>0.05）。培养2周,两组凝珠甲苯胺蓝染色均呈阳性,但无明显细胞外基质形成,Ⅱ型胶原抗体染色均呈弱阳性;培养4周,两组凝珠甲苯胺蓝染色均显示位于细胞团块外周的细胞呈蓝色,中央的细胞染色不明显,细胞团外周蓝色染色物质较少,中央有较多紫红色物质,Ⅱ型胶原抗体染色均呈强阳性。H-E染色、甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原抗体染色均未发现两组BMSCs的转化生长有差异,增殖数量差异也无统计学意义。结论适量的庆大霉素局部缓释并未明显影响BMSCs的生长及转化,又可达到最小抑菌浓度;庆大霉素对BMSCs及软骨细胞超微结构的影响有待进一步探讨。
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| 关 键 词： | 骨髓 间质干细胞 庆大霉素类 藻酸钙 细胞培养技术 |
| 收稿时间： | 2013/1/29 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2013/4/18 0:00:00 |
Establishment of New Zealand rabbit BMSCs-gentamicin-calcium alginate 3D sustained-release system and in vitro evaluation |
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| SHEN Feng,KANG Yi-fan,FU Xiao-ming and TANG Hao.Establishment of New Zealand rabbit BMSCs-gentamicin-calcium alginate 3D sustained-release system and in vitro evaluation[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2013,34(5):482-487. |
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| Authors: | SHEN Feng KANG Yi-fan FU Xiao-ming and TANG Hao |
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| Institution: | 1. Department of Orthopaedics, Changhai Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China2. Department of Orthopaedics, No.169 Hospital of PLA, Hengyang 421000, Hunan, China*Corresponding author. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bone marrow mesenchymal stem cells gentamicins calcium alginate cell culture techniques |
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