|
|||||
|
|
| 腺病毒介导的血管内皮生长因子体外靶向性转染心肌细胞 | |
| 引用本文： | 张裕东,张宝仁,梅举,陈兰英,刘红,黄盛东,钱其军,吴红平,李林芳,肖海波,王晓伟.腺病毒介导的血管内皮生长因子体外靶向性转染心肌细胞[J].第二军医大学学报,2004,25(7):0759-0762. |
| 作者姓名： | 张裕东 张宝仁 梅举 陈兰英 刘红 黄盛东 钱其军 吴红平 李林芳 肖海波 王晓伟 |
| 作者单位： | 1. 第二军医大学长海医院胸心外科,上海,200433 2. 中国医学科学院心血管病研究所,北京,100037 3. 东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室,上海,200438 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(39970735) |
| 摘 要： | 目的:构建以鼠心肌轻链蛋白基因(mlc-2v)为启动子、携带人血管内皮生长因子hVEGF165基因的重组腺病毒载体,检测该重组腺病毒载体对心肌细胞转染的靶向性.方法:酶切腺病毒载体PDC315自身启动子CMV,构建腺病毒载体PDC317,分别接入hVEGF165、mlc-2v基因,构建腺病毒载体PDC-mlc-hVEGF165.鉴定正确后,将PDC-mlc-hVEGF165与Lipofectamine共转染至293细胞,经同源重组获得以mlc-2v为启动子、携带hVEGF165基因的重组腺病毒Ad-mlc-hVEGF165,同步构建无靶向性的重组腺病毒Ad-hVEGF165.扩增并测定滴度后,Ad-hVEGF165、Ad-mlc-hVEGF165分别转染体外培养的心肌细胞、骨骼肌细胞及平滑肌细胞,利用ELISA、Western印迹分析等方法检测Ad-mlc-hVEGF165转染心肌细胞的靶向性.结果:构建的病毒正确,病毒滴度为2.8×109 pfu/ml.转染3 d后,Ad-hVEGF165组在各培养细胞的上清液及细胞内均检测到VEGF的表达,而Ad-mlc-hVEGF165组仅在心肌细胞中有VEGF的表达,且Ad-mlc-hVEGF165组心肌细胞分泌的VEGF要少于Ad-hVEGF165组.结论:成功构建了以mlc-2v为启动子、携带人VEGF基因的重组腺病毒Ad-mlc-hVEGF165;该重组载体能体外靶向性转染心肌细胞并使之表达VEGF. |
| 关 键 词： | 血管内皮生长因子 心肌轻链蛋白启动子 转染 腺病毒 心肌细胞 |
| 收稿时间： | 2/6/2004 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 2004/5/24 0:00:00 |
Adenovirus-mediated vascular endothelial growth factor transfecting cardiomyocyte in vitro |
|
| ZHANG Yu-Dong ,ZHANG Bao-Ren ,MEI Ju ,CHEN Lan-Ying ,LIU Hong ,HUANG Sheng-Dong ,QIAN Qi-Jun ,WU Hong-Ping ,LI Lin-Fang ,XIAO Hai-Bo ,WANG Xiao-Wei.Adenovirus-mediated vascular endothelial growth factor transfecting cardiomyocyte in vitro[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2004,25(7):0759-0762. | |
| Authors: | ZHANG Yu-Dong ZHANG Bao-Ren MEI Ju CHEN Lan-Ying LIU Hong HUANG Sheng-Dong QIAN Qi-Jun WU Hong-Ping LI Lin-Fang XIAO Hai-Bo WANG Xiao-Wei |
| Institution: | ZHANG Yu-Dong 1,ZHANG Bao-Ren 1*,MEI Ju 1*,CHEN Lan-Ying 2,LIU Hong 2,HUANG Sheng-Dong 1,QIAN Qi-Jun 3,WU Hong-Ping 3,LI Lin-Fang 3,XIAO Hai-Bo 1,WANG Xiao-Wei 1 |
| Abstract: | |
| Keywords: | vascular endothelial growth factor mlc-2v transfection adenovirus myocardial cell |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |
| 点击此处可从《第二军医大学学报》浏览原始摘要信息 | |
| 点击此处可从《第二军医大学学报》下载免费的PDF全文 | |