GM-CSF在小鼠放射性复合切割伤中的异常表达及干预治疗实验

目的：对比观察小鼠放射性复合切割伤与单纯切割伤愈合过程中粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（Granulocyte-macrophage Colony Stimulating Factor，GM-CSF）动态表达水平的差异以及 GM-CSF对小鼠放射性复合切割伤的干预治疗效果，进一步探讨 GM-CSF 对放射性复合切割伤愈合的影响。方法：56 只雌性昆明种小鼠（20-22g）随机分为两组（实验组与对照组，n=28），实验组小鼠在 6 Gy 60 Co γ 全身一次性均匀辐照后，即刻于背部皮肤制作全层缺损伤口，构建放射性复合切割伤模型，对照组小鼠伤口制备部位、方法同实验组，但小鼠不作辐照处理。伤后 1、3、5、7d 分别处死小鼠（每个时间点各 7 只小鼠），取创面周围皮肤及下方的薄层肌肉组织，通过Real-Time PCR和免疫组化方法检测伤口愈合过程中GM-CSF mRNA及蛋白表达水平。随后，将 40 只同品系、同质量小鼠随机分为两组（n=20），按上述相同方法构建放射性复合切割伤小鼠模型，实验组小鼠于伤后 0、1、3、4、5、7、9、11、14d 给予rhGM-CSF(6000ng/ml) 凝胶涂抹创面，对照组小鼠给予空白凝胶涂抹，通过检测创面残余面积与胶原纤维水平，评价 rhGM-CSF 凝胶对放射性复合切割伤口的治疗效果。结果：致伤后 1-3d 辐照组GM-CSF mRNA及蛋白水平均显著低于对照组（P<0.05）；5-7d 时，对照组 GM-CSF mRNA及蛋白表达逐渐下降，而辐照组GM-CSF水平无明显改变。凝胶涂抹14d内，rhGM-CSF凝胶治疗组中小鼠皮肤伤口残余面积显著低于空白凝胶组（P<0.05）；Masson 染色显示：与空白凝胶组相比，rhGM-CSF 凝胶治疗后放射性复合切割伤口中可见显著增生、广泛分布，排列紧密的胶原纤维。结论：放射性复合切割伤口早期愈合过程中 GM-CSF mRNA及蛋白表达水平较正常伤口低，而持续给予 6000ng/ml rhGM-CSF 刺激可明显加快放射性复合切割伤的愈合进程。

Study on the abnormal expression level of GM-CSF in mice with radiation combined incised injury and intervention treatment