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| 腺病毒介导人血管内皮细胞生长因子基因感染NIH3T3细胞的实验研究 | |
| 引用本文： | 韩焱福,刘军,宋建星,潘银根,黄盛东,龚德军.腺病毒介导人血管内皮细胞生长因子基因感染NIH3T3细胞的实验研究[J].第二军医大学学报,2008,29(8):0929-0933. |
| 作者姓名： | 韩焱福 刘军 宋建星 潘银根 黄盛东 龚德军 |
| 作者单位： | 1. 第二军医大学长海医院整形外科,上海,200433 2. 江苏省启东市人民医院烧伤科,启东,226200 3. 第二军医大学长海医院胸心外科,上海,200433 |
| 摘 要： | 目的:探讨腺病毒介导人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)基因感染NIH3T3细胞后目的基因表达情况及其对细胞增殖分化的影响,并观察体内移植后的表达情况及其血管生成效应.方法:构建含hVEGF基因重组腺病毒Ad.hVEGF,体外感染NIH3T3细胞,采用荧光显微镜和流式细胞术检测其转染效果和转染率,采用免疫组化、RT-PCR和ELISA法分别检测转染后的NIH3T3细胞VEGF的表达情况.将转染后的NIH3T3细胞移植于小鼠背部皮肤缺损模型上,1周后取创面覆盖的脱细胞真皮组织标本,免疫组化检测组织VEGF的表达,并行组织新生血管计数.结果:携带hVEGF基因的重组腺病毒对于NIH3T3细胞具有较高的转染效率,转染效率与病毒感染复制数(multiplicities of infection,MOI)具有量效关系.MOI为100倍时,转染效率达95%.RT-PCR和免疫组化检测到,Ad.hVEGF感染NIH3T3细胞24 h后即可在基因和蛋白质水平表达,ELISA法检测到VEGF第3日表达分泌较高,7 d时达到表达高峰(1052 pg/ml),13 d后仍可检测到VEGF的表达.2周内MTT法动态检测D值,转染组细胞与未转染组细胞比较无显著性差异(P＞0.05).转染细胞体内种植后在组织中亦可明显表达VEGF,实验组新生血管数显著高于对照组(P＜0.01).结论:腺病毒介导的VEGF基因可有效转染NIH3T3细胞,体内外均可有效表达目的基因,并可促进移植组织血管新生. |
| 关 键 词： | 血管内皮细胞生长因子 NIH3T3细胞 腺病毒 细胞增殖 细胞分化 |
| 收稿时间： | 2007/12/21 0:00:00 |
| 修稿时间： | 3/26/2008 4:54:27 PM |
Adenovirus-mediated VEGF expression in NIH3T3 cells |
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| HAN Yan-fu,LIU Jun,SONG Jian-xing,PAN Yin-gen,HUANG Sheng-dong,GONG De-jun.Adenovirus-mediated VEGF expression in NIH3T3 cells[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2008,29(8):0929-0933. | |
| Authors: | HAN Yan-fu LIU Jun SONG Jian-xing PAN Yin-gen HUANG Sheng-dong GONG De-jun |
| Institution: | 1.Department of Plastic Surgery,Changhai Hospital,Second Military Medical University,Shanghai 200433,China;2.Department of Burn Surgery,the People's Hospital of Qidong,Qidong 226200;3.Department of Cardiothoracic Surgery,Changhai Hospital,Second Military Medical University,Shanghai 200433 |
| Abstract: | |
| Keywords: | vascular endothelial growth factor NIH3T3 cells adenovirus cell proliferation cell differentiation |
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