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孕妇血样采集后体外存放对血浆中胎儿游离DNA水平的影响
引用本文:李勤,张毅,丁宇烽,胡振林,孙树汉,惠宁.孕妇血样采集后体外存放对血浆中胎儿游离DNA水平的影响[J].第二军医大学学报,2008,29(9):1042-1045.
作者姓名:李勤  张毅  丁宇烽  胡振林  孙树汉  惠宁
作者单位:1. 第二军医大学长海医院妇产科,上海,200433
2. 第二军医大学基础部医学遗传学教研室,上海,200433
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:目的:探讨孕妇血样采集后体外存放过程中血浆游离DNA水平的影响因素.方法:采集孕妇血样,体外4℃存放6、36 h后,实时定量PCR检测孕妇外周游离DNA水平,AnnexinⅤ/PI双染色法流式分析血样白细胞死亡情况,速率法检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性,单相酶扩散法测定血浆DNA酶活性.结果:血样体外存放36 h后,血浆中β-globin基因的拷贝数较存放6 h的样品显著增加,而SRY基因拷贝数明显减少;4℃存放条件下,妊娠晚期孕妇外周血中胎儿DNA占总DNA百分比从6 h的(10.3±5.6)%下降到36 h的(3.0±2.1)%,差异有统计学意义(P<0.05).体外存放6 h的血样中基本未检出死亡细胞,而存放36 h的血样中分别检出了坏死和凋亡的白细胞;36 h样品血浆中LDH活性较6 h样品显著升高(P<0.05).单相酶扩散法结果表明,血浆DNA酶在4℃时虽然活性显著减弱,但仍然保持降解DNA的能力.结论:血样采集后体外存放时间过长会导致血浆总游离DNA增多,而胎儿DNA减少,这种变化可能与血样体外存放过程中白细胞死亡和血浆DNA酶对胎儿DNA的降解作用有关;胎儿DNA抽提应在血样采集后尽早(6 h内)进行.

关 键 词:孕妇  血浆  胎儿游离DNA  乳酸脱氢酶
收稿时间:3/3/2008 12:00:00 AM
修稿时间:6/19/2008 4:04:31 PM

Influence of delay in blood-processing on the level of cell-free fetal DNA in maternal plasma sample
LI Qin,ZHANG Yi,DING Yu-feng,HU Zhen-lin,SUN Shu-han,HUI Ning.Influence of delay in blood-processing on the level of cell-free fetal DNA in maternal plasma sample[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2008,29(9):1042-1045.
Authors:LI Qin  ZHANG Yi  DING Yu-feng  HU Zhen-lin  SUN Shu-han  HUI Ning
Institution:1.Department of Obstetrics and Gynecology,Changhai Hospital,Second Military Medical University,Shanghai 200433,China*2.Department of Medical Genetics,College of Basic Medical Sciences,Second Military Medical University,Shanghai 200433
Abstract:
Keywords:Dnase
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