| 靶向血管内皮细胞因子受体3小干扰RNA腺病毒表达载体的构建 |
| |
| 引用本文： | 吕志诚,苏芝兰,杨文元,张锋军.靶向血管内皮细胞因子受体3小干扰RNA腺病毒表达载体的构建[J].大连医科大学学报,2013,35(2):139-142. |
| |
| 作者姓名： | 吕志诚 苏芝兰 杨文元 张锋军 |
| |
| 作者单位： | 吕志诚 (兰州军区兰州总医院于四科,甘肃兰州,730050)； 苏芝兰 (甘肃武威市医院消化科,甘肃武威,733000)； 杨文元 (兰州军区兰州总医院于四科,甘肃兰州,730050)；张锋军 (兰州军区兰州总医院于四科,甘肃兰州,730050)； |
| |
| 摘 要： | 目的构建靶向血管内皮细胞因子受体3(VEGFR-3)的小干扰RNA重组腺病毒表达载体。方法将构建的靶向VEGFR-3特异性小干扰RNA真核表达载体pGenesil-siRNA的启动子及siRNA序列克隆入穿梭质粒pAdTrack,将质粒线性化处理后转化入pAdEasy。重组腺病毒载体线性化处理后转染HEK293细胞,包装重组腺病毒,并进行PCR鉴定、病毒滴度测定;扩增后感染结肠癌LoVo细胞并进行Western blotting检测VEGFR-3蛋白的表达。结果双酶切鉴定及测序证实pAdTrack-pG-siRNA及pAd-VEGFR3-siRNA质粒构建正确,扩增纯化测定重组病毒pAd-VEGFR3-siRNA的滴度为5.6×109pfu/mL。病毒感染结肠癌LoVo细胞后测定VEGFR-3蛋白表达明显降低。结论靶向VEGFR-3小干扰RNA的腺病毒载体构建成功。
|
| 关 键 词： | VEGFR-3基因 RNA干扰 腺病毒 表达载体 |
| 收稿时间： | 2012/11/4 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2013/1/20 0:00:00 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《大连医科大学学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《大连医科大学学报》下载免费的PDF全文 |
|
