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人心房肌KChIP2基因表达质粒pEGFP-KChIP2
引用本文:谭晓秋,曾晓荣,白志茹,杨艳,刘智飞,陈桂兰,裴杰.人心房肌KChIP2基因表达质粒pEGFP-KChIP2[J].泸州医学院学报,2009,32(3):209-213.
作者姓名:谭晓秋  曾晓荣  白志茹  杨艳  刘智飞  陈桂兰  裴杰
作者单位:泸州医学院心肌电生理学研究室,四川泸州,646000
基金项目:教育部重点资助项目,四川省教育厅重点项目 
摘    要:目的:KChIPs作为瞬时外向钾通道(Ito)最重要的辅助亚基,在调控通道基因表达和电流特性中起重要作用。本实验拟构建人心房肌KChIP2基因表达质粒,为研究KChIP2对Ito的调控功能奠定基础。方法:①提取人心房肌总RNA,逆转录得到cDNA;②通过特异性引物进行PCR扩增得到KChIP2编码区全长序列,亚克隆到pMD18-T载体中.得到重组克隆质粒pMD18-T—KChIP2;③再设计带有酶切位点HindⅢ和BamH Ⅰ的特异性引物,对重组克隆质粒pMD18-T—KChIP2进行PCR扩增,得到含有酶切位点的KChIP2编码区全长序列;④对含有酶切位点的KChIP2全长片段和pEGFP—c1进行HindⅢ和BamH Ⅰ双酶切反应,然后进行电泳后胶回收,再进行连接和转化反应;⑤提取质粒,测序鉴定。结果:质粒测序结果与PubMed数据库KchIP2(AY026328)序列比对,同源性为99%。结论:成功构建人心房肌KChIP2基因表达质粒,为下一步转染实验研究KChIP2对瞬时外向钾通道的功能调控奠定了基础。

关 键 词:瞬时外向钾通道  心肌细胞  钾通道相关蛋白2  基因克隆

CONSTRUCTION AND IDENTIFICATION OF EXPRESSION PLASMID PEGFP-KCHIP2 OF THE HUMAN ATRIAL MYOCYTES KCHIP2 GENE
Institution:Tan Xiaoqiu, et al( Institute of Myocardium Electrophysiology, Luzhou Medical College)
Abstract:
Keywords:Transient outside potassium channel  Cardiac myocytes  Kv channel-interacting proteins 2  Gene clone
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录!
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