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钩端螺旋体在不同宿主巨噬细胞内存活能力的比较
引用本文:罗云蔓,黄莉莉,刘伯玉,张彦,胡宝瑜,朱平,郭晓奎,何平,姜叙诚.钩端螺旋体在不同宿主巨噬细胞内存活能力的比较[J].上海交通大学学报(医学版),2011,31(7):869-874.
作者姓名:罗云蔓  黄莉莉  刘伯玉  张彦  胡宝瑜  朱平  郭晓奎  何平  姜叙诚
作者单位:1. 上海交通大学基础医学院病理学教研室,上海,200025
2. 上海交通大学基础医学院病原生物学教研室,上海,200025
3. 上海交通大学基础医学院细胞生物学教研室,上海,200025
基金项目:国家高技术研究发展计划(“863”计划)(2006AA02Z176); 国家自然科学基金(30770820); 上海市自然科学基金(06ZR14056); 上海市卫生局科研课题(2008045)~~
摘    要:目的通过比较钩端螺旋体(钩体)在人和小鼠单核-巨噬细胞内的存活情况,探讨固有免疫在钩端螺旋体病致病机制中的作用。方法将钩体秋季血清群强毒株56606v株及其经体外多次传代的弱毒株56606 a株在体外分别感染经佛波酯(PMA)诱导分化的人单核细胞系THP-1和小鼠单核-巨噬细胞系RAW 264.7。感染后2、24、72 h,采用免疫荧光染色激光共聚焦显微镜观察并计算两种细胞的含菌细胞百分数;感染后2、12、24、48和72 h,采用Real-Tim e PCR技术定量检测可间接反映细胞内钩体存活数量的钩体16S rRNA的表达。结果随着感染时间的延长,两种细胞的含菌细胞百分数逐渐降低;Real-Tim e PCR检测结果显示:随着感染时间的延长,两种细胞内钩体16S rRNA的表达逐渐下调,细胞内钩体的存活数量逐渐减少。结论钩体在人和小鼠单核-巨噬细胞内均不能存活和繁殖,提示致病性钩体通过抗巨噬细胞的杀灭降解而在胞内的存活和繁殖可能不是钩体感染人类宿主的主要致病途径,其发病机制有待进一步阐明。

关 键 词:钩端螺旋体  巨噬细胞  活性  实时荧光定量PCR

Comparison of viability of Leptospira in macrophages from different hosts
LUO Yun-man,HUANG Li-li,LIU Bo-yu,ZHANG Yan,HU Bao-yu,ZHU Ping,GUO Xiao-kui,HE Ping,JIANG Xu-cheng.Comparison of viability of Leptospira in macrophages from different hosts[J].Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science,2011,31(7):869-874.
Authors:LUO Yun-man  HUANG Li-li  LIU Bo-yu  ZHANG Yan  HU Bao-yu  ZHU Ping  GUO Xiao-kui  HE Ping  JIANG Xu-cheng
Institution:LUO Yun-man1,HUANG Li-li2,LIU Bo-yu2,ZHANG Yan2,HU Bao-yu2,ZHU Ping3,GUO Xiao-kui2,HE Ping2,JIANG Xu-cheng1(1.Department of Pathology,2.Department of Microbiology and Parasitology,3.Department of Cell Biology,Basic Medical College,Shanghai Jiaotong University,Shanghai200025,China)
Abstract:Objective To explore the role of innate immunity in the pathogenesis of leptospirosis by comparing the viability of Leptospira in mononuclear macrophages of human and mouse origin. Methods Human monocytic cell lines(THP-1) treated with phorbol myfismte acetate(PMA) to be differentiated into macrophages and murine mononuclear macrophages cell lines(RAW264.7) were infected with Leptospira interrogans serovar Autumnalis strain autumnalis #56606(56606v) and avirulent strain(56606a) in vitro.Laser scanning confo...
Keywords:Leptospira  macrophages  viability  Real-Time PCR  
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