| 成人骨髓间充质干细胞的体外培养和表型鉴定 |
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| 引用本文： | 柳向东,柴冈,李东,崔磊,刘伟,曹谊林.成人骨髓间充质干细胞的体外培养和表型鉴定[J].上海交通大学学报(医学版),2004,24(4). |
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| 作者姓名： | 柳向东 柴冈 李东 崔磊 刘伟 曹谊林 |
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| 作者单位： | 上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程研究与开发中心,上海,200235 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)，上海第二医科大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 目的建立成人骨髓间充质干细胞(hMSCs)的分离培养方法,并对其表面标志进行检测,研究骨髓间质干细胞(MSC)基本生物学特性.方法采用Percoll(1.073 g/mL)梯度离心分离hMSCs,体外扩增,流式细胞仪检测hMSCs表面抗原表达.结果成人骨髓间质干细胞在体外扩增原代及传代培养显示,hMSCs具有活跃增殖的能力,每10 mL骨髓可获得(1.25±0.56)×106个原代细胞,7代可获得(5.32±1.15)×1010个细胞(n=5),随着传代次数的增加,细胞的增殖能力下降.流式细胞仪检测生长良好的第3代hMSC显示CD29、CD44、CD106、CD105、CD166、HLA-A/B/C表达阳性,CD34、CD45、CD14、CD31、CD49d、CD54、HLA-DR/DP/DQ表达为阴性.细胞周期分析显示,hMSCs中,S+G2+M期的细胞约占(16.25±3.18)%,其中S期为(4.12±2.35)%;而处于G0+G1期的细胞总数占(76.35±5.28)%,说明大部分细胞仍然处于静止期.流式细胞仪检测表明分离的hMSCs具有间充质干细胞的特征.结论 hMSCs有很强的自我更新能力,在体外传代培养可维持良好的干细胞生物学特性,为进一步深入研究hMSCs作为组织工程种子细胞的应用提供参数.
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| 关 键 词： | 骨髓 间充质干细胞 细胞培养 组织工程 |
Isolation in vitro cultivation and phenotype identification of human bone marrow-derived mesenchymal stem cells |
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