| 人IL-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建 |
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| 引用本文： | 陈紫千,汤耀卿,张奕,张轶,刘新垣,邹卫国,张圣道.人IL-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建[J].上海交通大学学报(医学版),2004,24(9). |
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| 作者姓名： | 陈紫千 汤耀卿 张奕 张轶 刘新垣 邹卫国 张圣道 |
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| 作者单位： | 1. 上海第二医科大学瑞金医院消化外科,上海,200025
2. 中国科学院上海生命科学院细胞生化所 |
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| 摘 要： | 目的构建人IL-10基因的重组腺病毒并进行体外表达和检测.方法从质粒pcDNA3IL-10的CMV启动子下游完整切下IL-10 cDNA的片段,将其定向插入Gateway载体,在克隆酶的作用下将阳性克隆质粒转入目的腺病毒载体.PacI酶线性化IL-10腺病毒DNA后阳离子质脂体转染293A细胞,获得人IL-10的复制缺陷型重组腺病毒.体外感染人胰腺癌细胞株Bxpc-3和大鼠胰腺细胞株AR-42J;Western blot检测人IL-10的表达.结果成功地构建人IL-10重组腺病毒,病毒滴度达2×109PFU/mL.体外感染的细胞株均检测到IL-10的表达.结论构建复制缺陷型重组腺病毒能够介导IL-10的基因表达,为细胞因子的抗炎治疗奠定实验基础.
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| 关 键 词： | 腺病毒载体 IL-10 基因表达 |
Construction of replication-deficient human IL-10 recombinant adenovirus |
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