| 大鼠脾脏树突状细胞的体外分离培养 |
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| 引用本文： | 斯东锋,岳嘉宁,杨勇,李济宇,全志伟.大鼠脾脏树突状细胞的体外分离培养[J].上海交通大学学报(医学版),2007,27(6):755-758. |
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| 作者姓名： | 斯东锋 岳嘉宁 杨勇 李济宇 全志伟 |
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| 作者单位： | 上海交通大学医学院新华医院普外科 上海200092 |
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| 摘 要： | 目的建立大鼠脾脏树突状细胞(DCs)的体外分离和培养方法,并进行相关鉴定。方法根据DC低密度和短暂黏附的特点,用梯度密度离心方法分离出大鼠脾脏DC前体和单核细胞,在加入30ng/mL粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素-4(IL-4)的DMEM培养基中,分别培养7d和14d后收集细胞,流式细胞仪检测DCs表面抗原OX62、CD80、CD86和主要组织相容性复合物-Ⅱ类(MHC-Ⅱ)分子的表达情况。结果新鲜分离的大鼠脾脏DCs细胞呈圆形,胞体小,在培养液中悬浮生长;表面抗原表达很低。诱导分化7d时,部分细胞体积增大且形态不规则,表面呈毛刺样,细胞核大而不规则;MHC-Ⅱ分子呈较高水平表达,CD80、CD86表达较低。诱导分化14d时,大部分细胞呈现典型的树突状细胞的形态;MHC-Ⅱ分子呈高表达,CD80、CD86表达增加,OX62表达阳性率为25.0%~86.2%。结论密度梯度离心结合较低浓度GM-CSF IL-4培养,是大鼠脾脏DCs体外分离和培养的简单、经济且有效的方法。
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| 关 键 词： | 树突状细胞 脾脏 分离培养 鉴定 |
| 文章编号： | 0258-5898（2007）06-0755-04 |
| 修稿时间： | 2006-10-17 |
In vitro isolation and culture of dendritic cells from rat spleen |
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