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沉默CDH1基因促进非小细胞肺癌A549细胞系转移侵袭的机制
摘    要:目的探究小干扰RNA(siRNA)沉默非小细胞肺癌A549细胞系E-钙黏蛋白(E-cadherin)基因(CDH1)后对于A549细胞转移和侵袭的促进作用。方法采用siRNA技术沉默A549细胞中的CDH1基因,采用RT-QPCR和Western blot法检测沉默后的基因表达与蛋白表达。将细胞分为对照组(Control)、siRNA阴性组(siRNA-NC)和siRNA基因沉默组(siRNA-CDH1),CCK-8检测基因沉默后12、24、48、72 h细胞活力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化,Transwell小室检测细胞侵袭能力的变化,Western blot法检测细胞转移侵袭关键因子波形蛋白(vimentin),基质金属蛋白MMP-2和MMP-9,以及N-cadherin的表达水平。RT-QPCR检测vimentin、MMP-2、MMP-9以及Slug、Snail的mRNA表达水平。结果 CDH1沉默后,A549细胞活力显著增高,且呈时间依赖性,相比Control组和siRNA-NC组差异有统计学意义(P0.05)。细胞划痕实验和Transwell小室实验结果显示,CDH1沉默后细胞迁移和侵袭能力显著增强,相比Control组和siRNA-NC组差异有统计学意义(P0.05)。siRNA-CDH1组中vimentin、MMP-9、MMP-2以及N-cadherin的表达显著上调,vimentin、MMP-9、MMP-2以及Slug、Snail的mRNA表达水平也上调,相比Control组和siRNA-NC组差异有统计学意义(P0.05)。结论 CDH1缺失可以增加A549细胞的增殖能力以及侵袭能力。

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