乏氧环境下骨骺干细胞株在软骨载体中的相容性、增殖和分化成软骨的实验研究

目的观察乏氧环境中转染PTHrP基因的骨骺干细胞株在不同浓度HIF-1作用下与组织工程软骨载体材料的相容性,以及在软骨载体材料中骨骺干细胞株的增殖、分化成软骨作用。方法乏氧环境中,携带骨骺干细胞株的软骨载体置于含不同浓度HIF-1(0、20、40、80、100、120、140及160 pmol/L)的培养诱导液中培养,MTT法检测骨骺干细胞在载体上的黏附率及骨骺干细胞增殖情况;骨骺干细胞经转化生长因子1(TGF-1)诱导2周后免疫组化检测Ⅱ型胶原(collagenⅡ)、Aggrecan软骨蛋白聚糖表达情况;诱导后的骨骺干细胞与载体复合培养后4周取材电镜下行组织学观察软骨结节形成情况。结果细胞在载体上黏附率90.5%;乏氧环境中HIF-1可促进骨骺干细胞增殖,增殖效应与HIF-1剂量有一定的依赖性;经TGF-1诱导2周后collagenⅡ、Aggrecan免疫组化染色阳性;诱导后的骨骺干细胞在载体内生长增殖良好,4周时可见新生类软骨样组织形成。结论乏氧环境下转染PTHrP基因的骨骺干细胞与载体具有良好的相容性;乏氧环境下HIF-1能促进骨骺干细胞株的增殖、分化成软骨,其促进作用有一定的剂量依赖性。