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转化生长因子β1/Smad3促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究
引用本文:王运涛,吴小涛,郑启新,陈辉,李永刚,茅祖斌.转化生长因子β1/Smad3促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究[J].医学研究生学报,2007,20(7):689-692,786.
作者姓名:王运涛  吴小涛  郑启新  陈辉  李永刚  茅祖斌
作者单位:1. 东南大学附属中大医院骨科,江苏南京,210009
2. 华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,湖北武汉,430022
基金项目:东南大学校科研和教改项目
摘    要:目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad3信号促进大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)成骨分化的机制.方法:常规细胞培养、免疫细胞化学染色观察TGF-β1作用下MSC中Smad3的表达情况;脂质体介导稳定转染Smad3中部分C端功能域突变体(Smad3△C),间接免疫荧光试验鉴定;采用RT-PCR检测转染细胞中碱性磷酸酶(ALP)和核心结合因子(cbfa1)mRNA的表达,用Gomori钙钴法定性检测ALP,用对硝基苯磷酸盐(PNP)法检测细胞ALP活性,观察Smad3△C对MSC成骨分化的影响.结果:MSC细胞表达Smad3,受TGF-β1刺激后,呈现出即刻由细胞质向细胞核转位的趋势.稳定转染细胞中c-Myc抗原阳性表达;受TGF-β1刺激后,MSC和空载体对照MSC(V-MSC)中ALP染色呈强阳性反应,而Smad3△C-MSC中阳性率仅为34.9%(P<0.01);MSC和V-MSC中ALP、cbfa1 mRNA的表达水平以及ALP活性明显高于Smad3△C-MSC(P<0.05或P<0.01),而MSC和V-MSC之间无显著性差异(P>0.05).结论:MSC中的Smad3是作为TGF-β1信号转导通路下游转导介质而存在的;通过Smad3选择性调节,具有多重生物学效应的TGF-β1才得以实现其促进MSC成骨分化的功能.

关 键 词:转化生长因子β1  骨髓间充质干细胞  细胞分化  组织工程
文章编号:1008-8199(2007)07-0689-04
收稿时间:2006-08-16
修稿时间:2006-08-162006-10-18

Transforming growth factorβ1/Smad3 promotes osteoblastic differentiation of rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells in vitro
WANG Yun-tao,WU Xiao-tao,ZHENG Qi-xin,CHEN Hui,LI Yong-gang,MAO Zu-bin.Transforming growth factorβ1/Smad3 promotes osteoblastic differentiation of rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells in vitro[J].Bulletin of Medical Postgraduate,2007,20(7):689-692,786.
Authors:WANG Yun-tao  WU Xiao-tao  ZHENG Qi-xin  CHEN Hui  LI Yong-gang  MAO Zu-bin
Institution:1. Department of Orthopaedics, Zhongda Hospital, Southeast University, Nanjing 210009, Jiangsu,China; 2. Department of Orthopaedics, Union Hospital, Tongfi Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022, Hubei, China
Abstract:
Keywords:Smad3
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