Ⅱ级膀胱尿路上皮癌microRNA差异表达及意义

目的microRNA（miRNA）通过调节原癌基因／抑癌基因或miRNA自身丢失／突变参与肿瘤的发生与形成，其差异表达可作为肿瘤早期诊断、疗效、预后评估的指标，有望成为肿瘤治疗的新靶点。膀胱尿路上皮癌是我国泌尿系恶性肿瘤中最常见的肿瘤，其发病机制目前仍不清楚。文中对Ⅱ级膀胱尿路上皮癌细胞中miRNA的差异表达及意义进行初步探讨。方法取手术切除的新鲜Ⅱ级膀胱尿路上皮癌及正常膀胱黏膜组织各3例保存于液氮中，用Trizol试剂提取总RNA，用Nanodrop及变性琼脂糖凝胶电泳进行RNA检测，用标记酶Hy3^TM荧光基团标记RNA的探针和miRCURY^TM芯片杂交，用GenePix4000B芯片扫描仪及GenePixproV6．0进行图像采集和数据分析，用荧光定量RT—PCR验证。结果Ⅱ级膀胱尿路上皮癌与正常膀胱黏膜上皮组织共有21个差异表达基因，表达上调者12个：hsa—miR-203、hsa—miR-876—3p、hsa—miR-29b-1＊、hsa—miR-665、hsa—miR-668、hsa—miR-181b、hcmv—miR—US25—2—5p，hsa—miR-768—3p，hsa—miR-548d-5p、hsa—miR-518c＊、hsa—miR-145＊，hsa—miR-363＊，表达下调者9个：hsa—miR-126、hsa—miR-140—3p、hsa—miR-223、hsa—miR-300、hsa—miR-24—2＊、hsa—miR-627、hsa—miR-142—3p、hsa—miR-744、hsa—miR-142—5p随机选择hsa—miR-363＊、hsa—miR-627、hsa—miR-768—3p、hsa—miR-3004个基因差异表达的miRNA用RT—PCR验证，与基因芯片结果一致。结论膀胱尿路上皮癌与正常膀胱黏膜组织中存在差异表达的miRNA基因，可能是导致膀胱尿路上皮癌的发生及发展的重要原因。