| 人CIDE3基因克隆和真核表达载体构建及促凋亡作用的研究 |
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| 引用本文： | 王淑芳,李青,姚丽,程虹,张静,叶菁,李繁烦,李南林.人CIDE3基因克隆和真核表达载体构建及促凋亡作用的研究[J].医学研究生学报,2007,20(7):682-684,688,787. |
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| 作者姓名： | 王淑芳 李青 姚丽 程虹 张静 叶菁 李繁烦 李南林 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院,病理科,陕西西安,710032
2. 第四军医大学西京医院,血管外科,陕西西安,710032 |
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| 摘 要： | 目的：克隆人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子3（CIDE3）全长基因,构建真核表达质粒pcDNA3.1（＋）-CIDE3,并检测其促凋亡作用.方法：①提取人腹部皮下白色脂肪组织的总RNA,经RT-PCR获得CIDE3全长基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1（＋）,构建重组质粒pcDNA3.1（＋）-CIDE3,并进行序列测定.②用脂质体法将pcDNA3.1（＋）-CIDE3转染人宫颈癌细胞系HeLa细胞,通过TUNEL法检测细胞凋亡情况.结果：①经RT-PCR扩增得到特异性717 bp的目的片段,构建的重组质粒pcDNA3.1（＋）-CIDE3经序列测定,结果与Genbank发表的序列完全一致.②转染Hela细胞后,经Tunel染色法检测发现,转染pcDNA3.1（＋）-CIDE3后有大约25%的细胞发生了凋亡,与转染空质粒pcDNA3.1（＋）（＜5%）及未转染质粒的细胞相比,其凋亡细胞明显增多.结论：成功克隆了人CIDE3全长基因,构建了真核表达质粒pcDNA3.1（＋）-CIDE3,并验证了CIDE3基因可诱导细胞发生凋亡的生物学作用,为进一步研究CIDE3的生物学功能奠定了坚实基础.
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| 关 键 词： | 人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子3 基因克隆 真核表达 凋亡 |
| 文章编号： | 1008-8199（2007）07-0682-03 |
| 收稿时间： | 2005-09-21 |
| 修稿时间： | 2005-09-212005-10-25 |
The cloning and construction of eukaryotic expression vector of human CIDE3 and its proapoptotic effect on HeLa cells |
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| WANG Shu-fang,LI Qing,YAO Li,CHENG Hong,ZHANG Jing,YE Jing,LI Fan-fan,LI Nan-lin.The cloning and construction of eukaryotic expression vector of human CIDE3 and its proapoptotic effect on HeLa cells[J].Bulletin of Medical Postgraduate,2007,20(7):682-684,688,787. |
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| Authors: | WANG Shu-fang LI Qing YAO Li CHENG Hong ZHANG Jing YE Jing LI Fan-fan LI Nan-lin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cell death-inducing DFFd5-1ike effectors 3 Gene clone Eukaryotic expressionvector Apoptosis |
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