| HCV IRES特异性抑制性RNA二级结构模拟及自剪切转录载体构建 |
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| 引用本文： | 梁雪松,周永兴,连建奇,郝春秋,王临旭.HCV IRES特异性抑制性RNA二级结构模拟及自剪切转录载体构建[J].医学研究生学报,2002,15(3):189-192. |
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| 作者姓名： | 梁雪松 周永兴 连建奇 郝春秋 王临旭 |
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| 作者单位： | 第四军医大学唐都医院感染病科,陕西西安,710038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助 (批准号 :30 0 0 0 14 7) |
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| 摘 要： | 目的：构建可保证HCV IRES特异性抑制性RNA（IRNA）序列完整的转录载体。方法：应用计算机软件模拟IRNA二级结构；体外化学合成IRNA及其互补的cDNA，以AatⅡ和XbaⅠ双酶切后克隆入具自剪切作用的顺式核酶载体pGEMRz中；应用酶切方法、PCR和测序法对重组载体进行三重鉴定；最后对重组体进行体外转录。结果：计算机模拟发现HCV IRES特异性IRNA二级结构包括两个环、一个茎状结构和一个膨出，在其序列两端加3－5个碱基不会改变其二级结构，而缺失3－5个碱基却会明显改变其结构。经三重鉴定证实，目的序列被正确地克隆入质粒pGEMRz，并 经体外转录得到约70个碱基大小的IRNA。结论；本研究构建转录载体pGRz-IRNA可保证IRNA序列的完整性。
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| 关 键 词： | HCV IRES 抑制性RNA 体外转录 |
| 文章编号： | 1008-8199(2002)03-0189-04 |
| 修稿时间： | 2001年12月25 |
Structure modeling and construction recombinant plasmid of HCV IRES specific inhibitor RNA(IRNA) |
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| LIANG Xue song,ZHOU Yong xing,LIAN Jian qi,HAO Chun qiu,WANG Lin xu.Structure modeling and construction recombinant plasmid of HCV IRES specific inhibitor RNA(IRNA)[J].Bulletin of Medical Postgraduate,2002,15(3):189-192. |
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| Authors: | LIANG Xue song ZHOU Yong xing LIAN Jian qi HAO Chun qiu WANG Lin xu |
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