| 微小RNA簇miR-302s条件性基因打靶小鼠的制备和鉴定 |
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| 引用本文： | 余飞,钱丽萍,丁利军.微小RNA簇miR-302s条件性基因打靶小鼠的制备和鉴定[J].实验动物与比较医学,2016(2):87-92. |
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| 作者姓名： | 余飞 钱丽萍 丁利军 |
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| 作者单位： | 1. 南京大学医学院附属鼓楼医院动物实验中心,南京,210008;2. 南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心,南京,210008 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30900847)，中央高校苗圃项目(20620140707)，南京市卫生杰出青年人才项目(JQ2014004) |
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| 摘 要： | 目的 制备微小RNA簇miR-302s条件性基因打靶小鼠.方法 构建miR-302s打靶载体,通过电穿孔的方法转染胚胎干细胞(ES细胞),用正负筛选法筛选阳性ES细胞并进行PCR鉴定和Southern分析.利用显微注射技术将正确同源重组的ES细胞注射至B6(Cg)-Tyr＜sup＞c-2J＜/sup＞/J小鼠囊胚腔内,注射后的囊胚植入受体小鼠子宫.将得到的嵌合体小鼠与野生型雌鼠交配获得miR-302s-LoxP基因打靶小鼠.结果 获得嵌合体小鼠11只,其中4只嵌合雄鼠嵌合率＞50％.利用嵌合体小鼠进行繁育交配,得到miR-302s基因打靶杂合子小鼠11只.结论 成功建立miR-302s条件性基因打靶小鼠模型,为进一步研究miR-302s基因功能打下基础.
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| 关 键 词： | miR-302s 条件性基因打靶小鼠 胚胎千细胞 同源重组 |
Generation and Identification of miR-302s Conditional Gene Targeting Mice |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | miR-302s Conditional gene targeting mice Embryonic stem(ES) cell Homologous recombination |
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