| 精原干细胞体内转染途径建立rsP3111转基因小鼠的可行性研究 |
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| 引用本文： | 周密,贾晓峰,史庭燕,王健,袁瑶,施惠娟.精原干细胞体内转染途径建立rsP3111转基因小鼠的可行性研究[J].实验动物与比较医学,2008,28(3). |
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| 作者姓名： | 周密 贾晓峰 史庭燕 王健 袁瑶 施惠娟 |
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| 作者单位： | 1. 复旦大学上海医学院,上海,200032
2. 国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室,上海市计划生育科学研究所,上海,200032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目
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上海市人口和计划生育委员会局管科技发展基金项目
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| 摘 要： | 目的构建目的基因rsp3111与荧光蛋白融合表达的质粒，并且实现目的基因在体外受精胚胎及在体附睾成熟精子中表达。为进一步通过精原干细胞体内转染途径建rsp3111转基因小鼠奠定基础。方法将rsp3111基因以Xholl和BdmHI酶切后插入经同样酶切处理的真核细胞表达质粒pDsRed-Monomer—N1中，重组质粒为pDsRed-Monomer—N1-rSP3111。采用共培养和脂质体介导方法将ICR小鼠精子与pDsRed-Monomer—N1-rSP3111质粒共孵育，再与成熟的卵母细胞体外受精；或用脂质体介导睾丸直接注射法，将pDsRed-Monomer—N1-rSP3111导入小鼠睾丸中，通过PCR及荧光显微镜观察体外受精后的受精卵及体内睾丸转染rsp3111基因后附睾精子中是否有外源rsp3111基因的表达。结果PCR结果表明，rsp3111基因成功地转入了附睾精子及受精卵中。荧光检测结果表明，目的基因rsp3111在体外受精胚胎及睾丸的曲细精管中均有表达。结论通过雄性生殖细胞载体法实现了大鼠配子特异性蛋白rSP3111在小鼠受精卵及睾丸、附睾精子中的表选为进一步通过精原干细胞体内转染途径建立rsp3111转基因小鼠奠定了基础。
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| 关 键 词： | 雄性生殖细胞载体法 特异性基因rsp3111 体外受精 |
Study on the Feasibility of Establishing of rsp3111 Trangenic Mouse through in vivo Transfection of Spermatogonial Stem Cells |
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| ZHOU Mi,JIA Xiao-feng,SHI Ting-yan,WANG Jian,YUAN Yao,SHI Hui-juan.Study on the Feasibility of Establishing of rsp3111 Trangenic Mouse through in vivo Transfection of Spermatogonial Stem Cells[J].Laboratory Animal and Comparative Medicine,2008,28(3). |
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| Authors: | ZHOU Mi JIA Xiao-feng SHI Ting-yan WANG Jian YUAN Yao SHI Hui-juan |
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