| siRNA靶向Rac1真核表达载体的构建与效应检测 |
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| 引用本文： | 张美霞,吴静,辛梅,李娟娟,张军军,严密.siRNA靶向Rac1真核表达载体的构建与效应检测[J].四川大学学报(医学版),2009,40(6). |
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| 作者姓名： | 张美霞 吴静 辛梅 李娟娟 张军军 严密 |
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| 作者单位： | 四川大学华西医院,眼科,成都,610041 |
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| 摘 要： | 目的 构建、纯化并鉴定Rac1特异性siRNA的真核表达载体,并在HeLa细胞中初步检测其转染率及对Rac1基因的抑制率.方法 体外合成含针对人、鼠的Rac1特异基因序列的siRNA链,定向克隆至pSUPER质粒中, 对重组质粒进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析.将抽提的质粒转染入HeLa细胞,荧光显微镜观察转染效率,荧光定量RT-PCR法鉴定其抑制Rac1基因表达的效果.结果 利用RNAi技术成功构建抑制 Rac1 表达的小干扰 RNA 重组载体,并成功转染到HeLa细胞中(载体转染率达到70%以上).在mRNA水平对Rac1基因的表达产生明显抑制作用(抑制率为87%以上).结论 成功构建了针对Rac1的siRNA真核表达载体,为进一步研究Rac1的功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | RNA干扰 新生血管视网膜病 基因治疗 |
Construction and Identification of Eukaryotic Expression Plasmid Expressing siRNA Targeting Rac1 and Detection of Its Specific Downregulation Effect |
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| ZHANG Mei-xia,WU Jing,XIN Mei,LI Juan-juan,ZHANG Jun-jun,YAN Mi.Construction and Identification of Eukaryotic Expression Plasmid Expressing siRNA Targeting Rac1 and Detection of Its Specific Downregulation Effect[J].Journal of West China University of Medical Sciences,2009,40(6). |
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| Authors: | ZHANG Mei-xia WU Jing XIN Mei LI Juan-juan ZHANG Jun-jun YAN Mi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rac1 |
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